Кроличье моноклональное антитело против Rpb1 CTD для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - P24928

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация Rpb1 CTD

• Ген POLR2A кодирует Rpb1, самую большую каталитическую субъединицу ДНК-зависимой РНК-полимеразы II (Pol II), ответственной за синтез пре-мРНК и некодирующих РНК. Фермент использует ДНК в качестве матрицы и рибонуклеозидтрифосфаты для полимеризации РНК, проходя стадии инициации, элонгации и терминации. (PubMed:23748380, PubMed:27193682, PubMed:30190596, PubMed:28108474, PubMed:8381534, PubMed:9852112) Связанные ссылки: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596, PMID:28108474, PMID:8381534, PMID:9852112
• CTD Rpb1, содержащий 52 тандемных гептапептидных повтора, служит платформой для транскрипционных регуляторов. Фосфорилирование по Ser5 (Ser5P) способствует уходу от промотора, а фосфорилирование Ser2 (Ser2P) необходимо для снятия паузы и элонгации. Кроме того, ацетилирование лизинов в CTD регулирует индукцию генов немедленного раннего ответа, а метилирование/диметилирование, как правило, подавляет экспрессию генов-мишеней. (PubMed:24207025, PubMed:26124092) Связанные ссылки: PMID:24207025, PMID:26124092
• Rpb1 обладает 3'→5' экзонуклеазной активностью, которая обеспечивает корректуру вновь синтезированной РНК, позволяя откат и вырезание ошибочно включенных нуклеотидов. (PubMed:8381534) Связанные ссылки: PMID:8381534
• Помимо своей ДНК-зависимой роли, Rpb1 проявляет РНК-зависимую РНК-полимеразную активность, удлиняя некодирующие РНК с использованием внутренней матрицы, и может реплицировать геном вируса гепатита дельта в ассоциации с вирусным малым дельта-антигеном.
• Rpb1 локализуется преимущественно в ядре, где происходит транскрипция, но также была обнаружена в цитоплазме и на хромосомах, что согласуется с её ролью в транскрипции и потенциальными внеядерными функциями.
• Посттрансляционные модификации Rpb1 включают фосфорилирование, ацетилирование, метилирование, убиквитинирование и сумоилирование, динамически регулируя её активность и взаимодействия.
• Альтернативный сплайсинг гена POLR2A приводит к образованию нескольких изоформ, хотя функциональные различия между ними еще предстоит полностью выяснить.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 1611-1710 в пределах CTD, что позволяет предположить, что антитело определяет общий Rpb1 или специфический эпитоп CTD; проверьте фосфо-зависимую реактивность с использованием образцов, обработанных фосфатазой.
• Для Вестерн-блоттинга полная длина белка Rpb1 предсказывается на уровне ~217 кДа; дополнительные полосы (например, ~64 кДа) могут представлять изоформы или продукты деградации; валидируйте с соответствующими контролями.
• Это антитело применялось в анализах ChIP; оптимизируйте условия сшивания и фрагментации хроматина для ваших конкретных локусов-мишеней.
• При иммунофлуоресценции ожидайте ядерное окрашивание; используйте совместное окрашивание с цитоплазматическим маркером для подтверждения локализации.

CamelBio: Ваш единый мост к поставщикам

CamelBio соединяет разработчиков диагностических систем и исследователей с широким портфелем сырья для ИВД, включая это моноклональное антитело против Rpb1 CTD для исследований транскрипции и регуляции генов. Независимо от того, нужны ли вам валидированные пары антител, реагенты оптом или специализированный поиск редких мишеней, наша команда обеспечивает надежные поставки и техническую поддержку. Оптимизируйте разработку ваших аналитических систем от концепции до клиники с помощью единых решений по закупкам от CamelBio.