Кроличий моноклональный антитело против Anti-RPA70/RPA1 для WB, IP, ELISA, ChIP - P27694

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация RPA70/RPA1

• Субъединица RPA70, кодируемая геном RPA1 (также известным как REPA1), представляет собой 70 кДа ДНК-связывающий компонент гетеротримерного комплекса репликационного белка A (RPA), который также включает субъединицы RPA2 и RPA3. Вместе они связывают и стабилизируют промежуточные продукты одноцепочечной ДНК (ssDNA).
• RPA незаменим для репликации хромосомной ДНК и координирует клеточный ответ на повреждение ДНК. Он активирует контрольные точки повреждения ДНК и облегчает выбор пути репарации. Связанные ссылки: PMID:9430682
• Через рекрутирование ATRIP, RPA активирует киназу ATR, главный регулятор ответа на повреждение ДНК, связывая обнаружение ssDNA с глобальной сигнализацией контрольных точек. Связанные ссылки: PMID:24332808
• RPA необходим для рекрутирования факторов гомологичной рекомбинации RAD51 и RAD52 в хроматин в местах двунитевых разрывов ДНК. Связанные ссылки: PMID:17765923
• В эксцизионной репарации нуклеотидов (NER), RPA напрямую рекрутирует XPA и XPG в места повреждений и необходим для этапа двойного разрезания/эксцизии этого пути репарации. Связанные ссылки: PMID:7697716
• RPA способствует поддержанию теломер, сохраняя целостность генома, а мутации в RPA1 связаны с нарушениями биологии теломер. Связанные ссылки: PMID:17959650 | PMID:34767620
• Альтернативный комплекс RPA, aRPA, образуется, когда RPA4 заменяет RPA2. Этот комплекс сохраняет способность связывать ssDNA, но функционирует в основном в репарации ДНК, а не в репликации хромосомной ДНК. Связанные ссылки: PMID:19996105
• RPA стимулирует 5'-3' хеликазную активность BRIP1/FANCJ, связывая ее с репарацией межцепочечных сшивок и поддержанием стабильности репликационной вилки. Связанные ссылки: PMID:17596542
• RPA70 преимущественно локализуется в ядре и в тельцах PML. Он подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование, ацетилирование и убиквитинирование, которые регулируют его активность и белок-белковые взаимодействия.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический пептид в пределах N-концевой области (аминокислоты 1–100). Для вестерн-блоттинга ожидаемый молекулярный вес составляет примерно 68 кДа; лизаты цельных клеток из культивируемых клеток человека или крысы являются подходящим исходным материалом.
• Для экспериментов ChIP обратите внимание, что эпитоп находится в неструктурированной области; рассмотрите возможность индуцирования повреждения ДНК (например, обработка УФ-излучением или гидроксимочевиной) для обогащения локусов, связанных с RPA, и проверки эффективности.
• В приложениях IP и ELISA предварительно протестируйте антитело в ваших конкретных буферных условиях, так как оно распознает линейный эпитоп. Включите соответствующие контроли.
• Проверьте специфичность антитела в вашей системе с использованием образцов с нокдауном с помощью siRNA или нокаутом с помощью CRISPR/Cas9.

CamelBio: Ваш универсальный мост для закупок

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств и исследователям комплексный портфель реагентов для IVD, включая валидированные моноклональные антитела, такие как этот клон anti-RPA70/RPA1. Помимо отдельных реагентов, мы способствуем оптовым и индивидуальным закупкам вспомогательных реагентов, редких антител и предоставляем технические консультации для разработки анализов в областях исследований повреждения, репарации и репликации ДНК. Сотрудничайте с нами, чтобы оптимизировать вашу цепочку поставок от концепции до клиники.