Поликлональное антитело к RPA2 для вестерн-блоттинга, иммуногистохимии на парафиновых срезах, иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии, ELISA - P15927

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация RPA2

• RPA2, также известный как субъединица репликационного белка A 32 кДа (RP-A p32) или RP-A p34, является компонентом гетеротримерного комплекса репликационного белка A (RPA), который включает RPA1 (70 кДа), RPA2 (32 кДа) и RPA3 (14 кДа).
• Комплекс RPA связывает и стабилизирует одноцепочечные ДНК (ssDNA) промежуточные продукты, возникающие во время репликации, репарации и рекомбинации ДНК, предотвращая их реассоциацию и способствуя рекрутированию ключевых метаболических белков.
• В репликации ДНК RPA необходим для фаз инициации и элонгации, обеспечивая процессивный синтез ДНК и защищая репликационную вилку.
• При повреждении ДНК комплекс RPA действует как сенсор и платформа: он рекрутирует киназу ATR через ATRIP, активируя контрольную точку повреждения ДНК, и рекрутирует факторы репарации, такие как RAD51 и RAD52 для гомологичной рекомбинации, а также XPA и XPG для эксцизионной репарации нуклеотидов.
• RPA2 также играет роль в эксцизионной репарации оснований (BER) через взаимодействие с урацил-ДНК гликозилазой (UNG) и рекрутирует SMARCAL1/HARP к местам повреждения для перезапуска репликационной вилки.
• Кроме того, RPA стимулирует 5'-3' хеликазную активность BRIP1/FANCJ, которая участвует в репарации межцепочечных сшивок и поддержании теломер. Связанные ссылки: PMID:17596542
• Белок преимущественно ядерный и локализуется в тельцах PML; он подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование, ацетилирование и убиквитинирование, которые регулируют его функции в метаболизме ДНК.
• Альтернативный сплайсинг генерирует несколько изоформ, что отражается в наблюдаемых молекулярных массах 29, 30 и 38 кДа.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует остаткам 1-270 человеческого RPA2; следовательно, антитело может распознавать несколько изоформ. При вестерн-блоттинге ожидайте полосы в районе 29–38 кДа; валидируйте на соответствующих человеческих клеточных линиях или тканях.
• RPA2 является ядерным фосфопротеином. Рекомендуется использовать ингибиторы фосфатаз в буферах для лизиса и, при необходимости, сравнивать с образцами, обработанными фосфатазой, для выявления сдвигов, зависящих от фосфорилирования.
• Для иммуногистохимии (IHC-P) рекомендуются стандартные методы демаскировки антигена. Оптимизируйте разведение первичного антитела и условия детекции для вашего типа ткани.
• Для иммунофлуоресценции (IF/ICC) используйте протоколы фиксации и пермеабилизации, подходящие для ядерных антигенов. Включайте соответствующие контроли для подтверждения специфичности.
• Это антитело также подходит для ELISA; убедитесь, что рекомбинантный белок или лизат правильно нанесены на планшет и заблокированы.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio предлагает производителям диагностических систем и исследователям комплексное решение для поставок сырья для ИВД, включая это кроличье поликлональное антитело к RPA2. Обладая опытом в области маркеров повреждения и репликации ДНК, CamelBio поставляет валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом, а также осуществляет поиск сырья для редких мишеней, чтобы ускорить разработку ваших анализов от концепции до клиники. Позвольте CamelBio стать вашим надежным партнером в создании надежных, высокопроизводительных диагностических тестов.