Кроличье моноклональное антитело Anti-RNF8 для WB, IHC-P, ELISA — O76064

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация RNF8

• E3-убиквитин-протеинлигаза RNF8 (RING finger protein 8) является ключевым медиатором ответа на повреждение ДНК и рекрутируется к двунитевым разрывам посредством ATM-фосфорилированного MDC1, где катализирует убиквитинирование гистонов H2A и H2AX по типу «Lys-63»-связи, способствуя сборке белков репарации ДНК, таких как BRCA1 и TP53BP1, в очагах, индуцированных ионизирующим излучением.
  Связанные публикации: PMID:18001824, PMID:18006705
• RNF8 способствует рекрутированию комплекса анемии Фанкони и таких факторов, как FAAP20, к межцепочечным сшивкам ДНК посредством убиквитинирования H2A/H2AX, а также координирует ATM-зависимое подавление транскрипции вблизи двунитевых разрывов, предотвращая столкновения транскрипции и репарации.
• Благодаря взаимодействию с различными ферментами E2 RNF8 может формировать полиубиквитиновые цепи, связанные по типу «Lys-48» (например, совместно с UBE2L6), что приводит к протеасомной деградации таких субстратов, как CHEK2, JMJD2A/KDM4A и KU80/XRCC5, тем самым регулируя выбор пути репарации и доступность хроматина.
  Связанные публикации: PMID:11322894, PMID:14981089, PMID:17724460
• Он участвует в деконденсации хроматина на более высоком уровне организации и косвенно активирует киназу ATM, способствуя убиквитинированию гистона H2B, которое запускает ацетилирование H4K16.
• RNF8 необходим для сперматогенеза, обеспечивая замещение гистонов в процессе созревания сперматозоидов, а также участвует в рекомбинации при переключении классов иммуноглобулинов благодаря своей роли в репарации двунитевых разрывов ДНК.
  Связанная публикация: PMID:22865450
• Белок преимущественно локализуется в ядре, дополнительно присутствуя в цитоплазме, срединном тельце и теломерах, что соответствует его многофункциональной роли в прогрессии клеточного цикла и поддержании стабильности генома.
• Экспрессия в тканях носит повсеместный характер; наиболее высокие уровни отмечаются в головном мозге, тимусе и печени в период внутриутробного развития, а у взрослых — в головном мозге и яичках, что подчёркивает его широкое значение для репарации ДНК и регуляции хроматина.
• Белок RNF8 содержит RING finger-домен и классифицируется как фосфопротеин; его молекулярная масса составляет около 55,5 кДа (UniProt: 55518 Да). Ключевые слова также указывают на его участие во взаимодействиях хозяин–вирус, связывании металлов (цинка) и конъюгации убиквитина.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевым аминокислотам 1–260 человеческого RNF8; поэтому антитело может распознавать эпитопы в N-концевой области, включая FHA-домен, участвующий в фосфозависимых взаимодействиях.
• При проведении вестерн-блоттинга ожидается, что RNF8 будет мигрировать при кажущейся молекулярной массе около 56 кДа в лизатах клеток человека, мыши и крысы; для подтверждения специфичности используйте соответствующие положительные и отрицательные контроли.
• Для IHC-P рекомендуется оптимизировать демаскирование антигенов (например, в цитратном буфере, pH 6,0) и проводить валидацию на тканях с известной экспрессией RNF8, таких как яички или головной мозг.
• Для ELISA конечным пользователям следует определить оптимальные концентрации для сорбции и условия детекции с использованием рекомбинантного антигена или соответствующих типов образцов.
• Сообщалось о перекрёстной реактивности с RNF8 мыши и крысы; перед рутинным применением проверьте эффективность в соответствующих модельных системах.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по снабжению

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям интегрированный доступ к широкому портфелю исходных материалов для IVD, поддерживая каждый этап — от разработки анализа до клинического применения. Наше антитело к RNF8 дополняет исследования репарации повреждений ДНК и разработку иммуноанализов; ассортимент включает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реагенты для повышения эффективности рабочего процесса. Для сложных мишеней или проектов с особыми требованиями CamelBio использует специализированные каналы поставок для поиска редких исходных материалов, упрощая процесс закупок и ускоряя путь от концепции до клинического применения.