Поликлональные антитела против RB для WB, IF/ICC, ELISA - P06400

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологические основы: Функция и локализация RB

• RB (ретинобластом-ассоциированный белок) является опухолевым супрессором и ключевым регулятором перехода клеточного цикла G1/S. Гипофосфорилированная форма связывает транскрипционные факторы E2F, подавляя транскрипцию генов, необходимых для входа в S-фазу. Фосфорилирование, зависящее от циклин/CDK, освобождает E2F, запуская прогрессию клеточного цикла (PubMed:10499802). RB также стимулирует переход G0-G1 через фосфорилирование со стороны CDK3/циклин-C (PubMed:15084261).

  Связанные источники: PMID:10499802 PMID:15084261

• Принимает прямое участие в формировании гетерохроматина, стабилизируя метилирование гистонов и рекрутируя гистоновые метилтрансферазы SUV39H1, KMT5B и KMT5C. Контролирует триметилирование лизина-20 гистона H4, что приводит к эпигенетической репрессии транскрипции.

• Опосредует транскрипционную репрессию SMARCA4/BRG1 через рекрутирование комплекса гистондеацетилазы (HDAC) к промотору c-FOS. В покоящихся нейронах комплекс репрессора фосфо-RB1-HDAC1 ингибирует транскрипцию c-FOS; при поступлении кальция кальциневрин дефосфорилирует RB1, снимая репрессию.

• Субклеточная локализация: ядро и цитоплазма.

• Экспрессируется в сетчатке и кератиноцитах крайней плоти (на уровне белка) (PubMed:20940255).

  Связанные источники: PMID:20940255

• Подвергается ключевым пост-трансляционным модификациям: ацетилированию, метилированию и обширному фосфорилированию, которые регулируют его активность и взаимодействия с другими молекулами.

• При вирусной инфекции крупный Т-антиген SV40, белок E7 ВПЧ или белок E1A аденовируса связываются с RB1, нарушая комплекс RB1‑E2F1 и отключая его функцию опухолевого супрессора.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует C-концевой области (аа 701‑928), которая хорошо консервативна и с высокой вероятностью обеспечивает реактивность к полноразмерному RB (~106 кДа).
• Для вестерн-блоттинга используйте среднемолекулярную маркерную лестницу белков для четкого разделения полосы 106 кДа. Для оптимальной детекции эндогенного RB рекомендуется использовать ядерные экстракты. Валидируйте антитело в релевантных человеческих клеточных линиях (например, с известным статусом RB) и используйте контроль с блокирующим пептидом при наличии неспецифического фона.
• В IF/ICC оптимизируйте условия фиксации и пермеабилизации; фиксация метанолом может лучше сохранить эпитопы ядерного RB. Для ELISA рекомбинантный иммуноген может использоваться в качестве положительного контроля.
• Как поликлональное антитело, полученное у кролика, может иметь незначительные вариации от партии к партии. Используйте подходящие контроли и проводите валидацию каждой новой партии.

CamelBio: Ваш единый центр по поиску реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов, исследовательским лабораториям и институтам широкий портфель антител и сырья класса IVD. Наши поликлональные антитела к RB поддерживают фундаментальные исследования в области контроля клеточного цикла, биологии опухолей и взаимодействий хозяин-вирус. Помимо этого продукта, мы предлагаем валидированные антительные пары, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, крупные партии вспомогательных реагентов и помощь в поиске сырья для редких мишеней, чтобы ускорить разработку ваших тест-систем от идеи до клинических испытаний.