Кроличья поликлональная антитело Anti-RAG1 для Вестерн-блоттинга (WB) и ИФА (ELISA) - P15918

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация RAG1

• RAG1 (белок 1, активирующий рекомбинацию, также известный как RAG-1 и RNF74) является каталитическим компонентом комплекса RAG, необходимого для V(D)J-рекомбинации, которая собирает разнообразные гены иммуноглобулинов и Т-клеточных рецепторов в развивающихся лимфоцитах.
• Он напрямую связывается с консервативными сигнальными последовательностями рекомбинации (RSS) и катализирует сайт-специфические разрывы двойной цепи ДНК по двухступенчатому механизму: первоначальный надрез выше гептамера, за которым следует формирование шпильки посредством трансэтерификации, создающей тупые сигнальные концы и законцованные кодирующие концы. RAG2 требуется для всех каталитических активностей.
• Помимо эндонуклеазной активности, RAG1 функционирует как E3 убиквитин-протеинлигаза, которая монoubiquitinates гистон H3 в неизвестных участках; эта модификация необходима для этапа соединения при V(D)J-рекомбинации. Кроме того, триметилирование H3 по лизину-4 (H3K4me3) стимулирует оба этапа расщепления.
• RAG1 локализуется в ядре, где он взаимодействует с хроматином для опосредования событий рекомбинации.
• Его экспрессия ограничена созревающими лимфоидными клетками, что согласуется с его ролью в развитии лимфоцитов.
• RAG1 также участвует в аллельном исключении пре-В-клеток, индуцируя ATM-зависимое перемещение одной аллели иммуноглобулина в прицентромерный гетерохроматин, предотвращая рекомбинацию второй аллели и обеспечивая клональность.
• Белок подвергается альтернативному сплайсингу, и его многофункциональная природа подчеркивается такими ключевыми словами, как связывание ДНК, эндонуклеаза, гидролаза, связывание металла (цинковый палец), трансфераза, конъюгация UBL и варианты заболеваний, связанные с тяжелым комбинированным иммунодефицитом (SCID).

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген охватывает N-концевую область (аминокислоты 1-270) человеческого RAG1, которая включает домен связывания ДНК. Эта область может обнаруживать несколько изоформ, возникающих в результате альтернативного сплайсинга.
• Для Вестерн-блоттинга прогнозируемый молекулярный вес составляет ~119 кДа. Рассмотрите возможность использования 6-8% SDS-PAGE геля и увеличенного времени переноса для белков с высокой молекулярной массой.
• Протоколы ИФА могут использовать покрытие рекомбинантным белком RAG1 или пептидом; валидируйте условия анализа в вашей матрице образцов для обеспечения специфичности.
• Ожидается перекрестная реактивность с мышью; проверьте работоспособность в лимфоидных тканях или клеточных линиях мыши при использовании в этих системах.
• Экстракты белков из человеческих или мышиных лимфоидных клеточных линий (например, Jurkat, Raji, EL4), вероятно, подходят в качестве положительного контроля; нелимфоидные клеточные линии могут служить отрицательным контролем.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и научно-исследовательским институтам комплексный доступ к сырью для IVD, техническим услугам и консультациям — охватывая все этапы от концепции до клиники. Фокусируясь на RAG1 и мишенях иммунной рекомбинации, мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и поиск сырья для редких мишеней для поддержки ваших исследований V(D)J-рекомбинации, иммунодефицитных расстройств и развития лимфоцитов, а также разработки анализов. Позвольте CamelBio эффективно удовлетворить ваши потребности в снабжении.