Поликлональные антитела против QPCT для WB, IF/ICC, ELISA — Q16769

Основные характеристики и параметры продукта

Биологические основы: функция и локализация QPCT

• Идентификация белка: QPCT (глутаминилпептидная циклотрансфераза), также известная как глутаминилциклаза (QC, sQC) и глутамилциклаза — это секретируемый фермент-трансфераза, кодируемый геном QPCT. Относится к семейству ацилтрансфераз и содержит цинксвязывающий активный центр.
• Основная ферментативная функция: Катализирует образование N-концевых пироглутамильных остатков из глутаминильных или глутамильных предшественников — критическая модификация для биоактивности и стабильности многих пептидов и белков.
• Специфичность к субстратам: Демонстрирует сниженное сродство к кислотным остаткам и триптофану, находящимся непосредственно рядом с N-концевым глутамином, но слабо зависит от длины пептидной цепи после второго остатка.
• Обработка бета-амилоида: В условиях in vitro превращает N-концевые усеченные пептиды бета-амилоида (например, [Glu-3]-бета-амилоид) в формы, модифицированные пироглутаматом, которые обладают повышенной склонностью к агрегации и нейротоксичностью.
• Связь с заболеваниями: Участвует в развитии болезни Альцгеймера за счет образования пироглутамат-бета-амилоидных пептидов, обнаруживаемых в сенильных бляшках; также может принимать участие в других амилоидных патологиях.
• Субклеточная локализация: Секретируется в межклеточное пространство, что соответствует его функции модификации внеклеточных субстратов: гормонов, хемокинов и амилоидных пептидов.
• Структурные особенности: Содержит дисульфидные связи, сайты N-связанного гликозилирования и сигнальный пептид; прогнозируемая молекулярная масса зрелого белка составляет примерно 40,9 кДа (экспериментально наблюдается около 41 кДа).
• Альтернативный сплайсинг: Ген QPCT подвергается альтернативному сплайсингу, в результате которого образуются несколько изоформ; иммуноген соответствует полноразмерной последовательности (1–361 аминокислотных остатка), поэтому антитела распознают все известные изоформы, содержащие этот регион.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует полноразмерному человеческому белку QPCT (остатки 1–361), что обеспечивает широкий охват эпитопов и позволяет распознавать как предшественник, так и зрелую форму белка. Поликлональная природа антител повышает чувствительность детекции всех сплайс-вариантов.
• При вестерн-блоттинге в восстанавливающих условиях ожидается появление специфической полосы около 41 кДа. Поскольку QPCT является секретируемым белком, в зависимости от постановки эксперимента предпочтительнее анализировать сыворотку, плазму или супернатант клеточной культуры, а не лизат цельных клеток.
• При иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (IF/ICC) требуется оптимизация протоколов фиксации и пермеабилизации для визуализации QPCT в компартментах секреторного пути; для окрашивания внеклеточного белка могут потребоваться условия без пермеабилизации. Возможно оценка ко-локализации с маркерами Гольджи или везикул.
• Для ELISA рекомендуется использовать антитело в формате сэндвича с отдельным захватывающим антителом; данное антитело может выступать в роли детектирующего реагента. Поскольку QPCT находится в растворимой форме в биологических жидкостях, он подходит для количественных анализов.
• Перекрестная реактивность с мышиным и крысиным QPCT позволяет использовать эти антитела в грызуных моделях нейродегенерации. Однако идентичность аминокислотной последовательности не составляет 100%, поэтому чувствительность необходимо валидировать для конкретного вида и ткани.

CamelBio: ваш универсальный поставщик реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов, лабораториям и исследовательским институтам упрощенный доступ к валидированным сырьевым материалам для ИВД на всех этапах разработки анализов. Для QPCT и других маркеров нейродегенеративных заболеваний мы поставляем оптимизированные антитела, пары антигенов, буферы и вспомогательные реагенты оптовыми партиями. Наш опыт позволяет работать с редкими мишенями и предоставлять услуги конъюгации по заказу, помогая вам ускорить разработку анализов пироглутамилпептидов от концепции до клинических испытаний.