Поликлональные антитела против PYCRL для Вестерн-блоттинга и ИФА - Q53H96

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция PYCRL и локализация

• PYCRL (пирролин-5-карбоксилатредуктаза 3), также известная как PYCR3, — это фермент, катализирующий заключительный этап биосинтеза пролина, отвечающий за превращение пирролин-5-карбоксилата (P5C) в L-пролин с использованием NAD(P)H в качестве кофактора. Эта реакция специфически связана с путем синтеза пролина из орнитина. Связанные ссылки: PMID:23024808 PMID:36414121
• Белок преимущественно локализован в цитоплазме, где он воздействует на цитоплазматический P5C, образующийся при катаболизме орнитина.
• PYCRL является членом семейства пирролин-5-карбоксилатредуктаз наряду с PYCR1 и PYCR2; однако PYCRL уникально посвящена маршруту превращения орнитина в пролин, тогда как другие изоформы функционируют преимущественно в синтезе пролина из глутамата.
• Альтернативный сплайсинг гена PYCR3 приводит к образованию нескольких вариантов транскриптов, которые могут давать rise к белковым изоформам с измененными функциями или регуляторными свойствами.
• Сообщалось о посттрансляционных модификациях, таких как ацетилирование, которые потенциально модулируют ферментативную активность или стабильность.
• Рассчитанный молекулярный вес белка PYCRL составляет примерно 28,7 кДа, что соответствует наблюдаемой полосе при 29 кДа в экспериментах с вестерн-блоттингом.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для вестерн-блоттинга (WB) готовьте лизаты цельных клеток из линий клеток человека или мыши, известных экспрессией PYCRL; ожидается одиночная полоса вблизи 29 кДа. Из-за поликлональной природы могут появиться несколько полос, если присутствуют перекрестно-реактивные эпитопы; рассмотрите использование пептидного блокирования для подтверждения специфичности.
• В применениях ИФА (ELISA) эти антитела можно использовать для прямого или сэндвич-ИФА для количественного определения PYCRL в биологических образцах; титруйте антитела для достижения оптимального соотношения сигнал/шум.
• Перекрестная реактивность с PYCRL мыши была продемонстрирована; для других видов анализ гомологии последовательностей может указать на потенциальную реактивность, но эмпирическая валидация необходима.
• Учитывая, что иммуноген охватывает остатки 13–286, антитела, вероятно, распознают множественные линейные и конформационные эпитопы; денатурирующие и восстанавливающие условия в WB обычно совместимы.
• При изучении метаболизма пролина комбинируйте эти антитела с ингибиторами орнитинаминотрансферазы для модуляции уровней субстрата PYCRL и оценки потока в пути.
• Всегда включайте соответствующие контроли, такие как линии клеток с нокаутом PYCRL или образцы, обработанные siRNA, для подтверждения идентичности полосы.

CamelBio: Ваш универсальный мост поставок

CamelBio предоставляет комплексное решение по поставкам для производителей IVD, лабораторий и научно-исследовательских институтов, предлагая валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные антитела, а также вспомогательные реагенты оптом. Эти поликлональные антитела против PYCRL поддерживают исследования метаболизма пролина, биосинтеза аминокислот и связанных патологических состояний. Для реагентов к редким мишеням или потребностей в разработке кастомных антител техническая команда CamelBio может помочь преодолеть разрыв от концепции до клинического применения.