Кроличьи поликлональные антитела против Pumilio 1 для WB, IF/ICC, ELISA - Q14671

Основные характеристики и параметры продукта

Биологические основы: функция и локализация Pumilio 1

• Пумалио гомолог 1 (PUM1) — это РНК-связывающий белок с последовательностной специфичностью, который действует как посттранскрипционный репрессор, связываясь с 3'-НТО мРНК мишеней через консенсусную последовательность элемента ответа Пумалио (PRE) 5'-UGUANAUA-3'. Связанные источники: PMID:18328718, PMID:21397187, PMID:21572425

• PUM1 опосредует репрессию двумя механизмами: прямое рекрутирование деаденилазного комплекса CCR4-POP2-NOT, приводящее к ингибированию трансляции и деградации мРНК, а также повышение доступности сайтов для микроРНК при репрессии, не зависящей от деаденилирования. Связанные источники: PMID:22955276, PMID:18776931, PMID:20818387, PMID:20860814

• После стимуляции факторами роста PUM1 фосфорилируется и связывается с 3'-НТО мРНК CDKN1B/p27, индуцируя конформационное изменение, которое открывает сайты связывания для miR-221 и miR-222, что приводит к эффективному подавлению экспрессии CDKN1B/p27 и быстрому входу клеток в клеточный цикл. Связанные источники: PMID:20818387

• PUM1 репрессирует программу генов, необходимых для поддержания стабильности генома, включая митотические факторы, факторы репарации ДНК и репликации ДНК; эта активность антагонизируется длинной некодирующей РНК NORAD, которая секвестирует PUM1 в цитоплазме. Связанные источники: PMID:26724866

• В нейронах PUM1 регулирует уровень мРНК ATXN1, связываясь с её 3'-НТО и подавляя транскрипты независимо от механизма микроРНК, что связано с патогенезом спинноцеребеллярной атаксии. Связанные источники: PMID:25768905, PMID:29474920

• PUM1 локализуется в цитоплазме, P-тельцах и цитоплазматических гранулах, он широко экспрессируется в тканях, включая мозг, сердце, почки, мышцы, кишечник и желудок, но отсутствует в определенных областях мозга, таких как мозжечок, мозолистое тело и гиппокамп.

• PUM1 участвует в цитоплазматическом распознавании вирусов, сперматогенезе и обновлении эмбриональных стволовых клеток путем нацеливания на мРНК для посттранскрипционной регуляции, ассоциирован с болезненными вариантами, связанными с эпилепсией, интеллектуальной недостаточностью и нейродегенерацией. Связанные источники: PMID:25340845

Экспериментальное руководство и технические рекомендации

• Иммуноген соответствует аминокислотам 1-130 человеческого Pumilio 1, нацелен на N-концевую область. Эта область может быть консервативной у разных видов, что объясняет наблюдаемую перекрестную реактивность с мышью.
• Для Вестерн-блоттинга предсказанная молекулярная масса составляет ~126 кДа. Используйте гель с подходящей процентной концентрацией и условия переноса для высокомолекулярных белков, рассмотрите возможность увеличения продолжительности стадий блокирования и отмывки для снижения неспецифического фона.
• При иммунофлуоресценции/ИФХ (ICC) изучение цитоплазматической и гранулярной локализации PUM1 следует проводить с использованием подходящей фиксации и пермеабилизации; при необходимости проверьте картину окрашивания с известными маркерами P-телец или стрессовых гранул.
• Для ИФА (ELISA) рекомбинантный белок-иммуноген может выступать в качестве положительного контроля. Титруйте антитело для оптимизации отношения сигнал/шум.
• Как и для любых поликлональных антител, для данного препарата возможна вариабельность между сериями; мы рекомендуем валидировать каждую новую серию в вашей конкретной экспериментальной системе.

CamelBio: ваш единый мост для снабжения

CamelBio специализируется на предоставлении производителям диагностики, лабораториям и научно-исследовательским институтам комплексного доступа к сырью для ИВД, техническим услугам и консультационной поддержке на всех этапах от разработки концепции до клинических испытаний. Для изучения Pumilio 1 и РНК-связывающих белков мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, объемные поставки вспомогательных реагентов и поиск редких мишеней для оптимизации разработки ваших тест-систем. Свяжитесь с нами, чтобы узнать, как наша единая цепочка поставок может ускорить реализацию вашего проекта.