Кроличье моноклональное антитело против PTBP2 для Вестерн-блоттинга, IP, IF и IHC - Q9UKA9

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация PTBP2

• PTBP2 (polypyrimidine tract-binding protein 2) — это РНК-связывающий белок, также известный как нейрональный PTB (nPTB), PTB-подобный белок (PTBLP) или brPTB. Он принадлежит к семейству hnRNP и является нейронально-обогащенным гомологом повсеместно экспрессируемого PTBP1.
• Связывается с интронными полипиримидиновыми трактами и опосредует негативную регуляцию сплайсинга экзонов. В нейрональных тканях может антагонизировать активатору сплайсинга NOVA1 для тонкой настройки выбора альтернативных экзонов.
• Играет дополнительные роли в регуляции трансляции, связывая посттранскрипционный контроль с результатами экспрессии генов.
• Локализуется преимущественно в ядре, что согласуется с его основной ролью в процессинге пре-мРНК.
• PTBP2 подвергается нескольким посттрансляционным модификациям, включая ацетилирование и фосфорилирование, которые могут модулировать его активность, внутриклеточную динамику или взаимодействия с белками.
• Белок в основном экспрессируется в мозге, но также обнаруживается в сердце и скелетных мышцах. Существует несколько изоформ: изоформы 1 и 2 являются нейронально-специфичными, изоформы 3 и 4 присутствуют в ненейрональных тканях, а изоформы 5 и 6 представляют собой укороченные формы в ненейрональных клетках.
• Обладает сниженным сродством к РНК по сравнению с PTBP1, что может влиять на его регуляторные роли в различных клеточных контекстах.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является N-концевой пептид (а.о. 1–100) человеческого PTBP2, регион, высококонсервативный у человека, мыши и крысы. Эта консервативность, вероятно, лежит в основе заявленной перекрестной реактивности.
• Для анализа методом Вестерн-блоттинга ожидается преобладающая полоса около 57 кДа, соответствующая полноразмерному PTBP2. Дополнительные полосы могут возникать из-за альтернативных изоформ или посттрансляционных модификаций; проверяйте специфичность с помощью соответствующих контролей.
• При иммунопреципитации рассмотрите возможность ковалентного сшивания антитела с шариками протеина A/G, чтобы минимизировать соэлюцию тяжелых/легких цепей, если они мешают последующему детектированию.
• Для иммунофлуоресценции (IF/ICC) и иммуногистохимии (IHC-P) следует подтвердить ядерную локализацию PTBP2. Оптимизируйте фиксацию (например, 4% PFA для IF, срезы, фиксированные формалином и залитые в парафин, для IHC) и пермеабилизацию (например, 0.1–0.2% Triton X-100) для достижения адекватного раскрытия эпитопа и четкости сигнала.
• Поскольку экспрессия PTBP2 наиболее высока в нейрональных тканях, используйте ткань мозга или нейрональные клеточные линии в качестве положительных контролей; ненейрональные клетки могут экспрессировать более низкие уровни или другие изоформы.
• При использовании ELISA убедитесь, что иммобилизованный антиген сохраняет нативную конформацию N-концевой области для поддержания связывания антитела.

CamelBio: Ваш единый источник поставок

CamelBio предлагает оптимизированную платформу для поставок производителям IVD и исследовательским лабораториям, ищущим высококачественные исходные материалы, такие как это моноклональное антитело к PTBP2. Помимо валидированных реагентов для детекции PTBP2, мы можем поставлять оптимизированные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты для исследований сплайсинга и нейродегенеративных заболеваний. Наша сеть также позволяет выполнять индивидуальный поиск редких мишеней и поставки реагентов в больших объемах, поддерживая ваши проекты от открытий до разработки диагностических средств.