Анти-PSAP (Просапозин) Поликлональные антитела кролика для Вестерн-блоттинга (WB), ИГХ (IHC-P), ИФ (IF/ICC), ИФА (ELISA) - P07602

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация PSAP (Просапозина)

• Просапозин (PSAP) — это предшественник гликопротеина длиной 524 аминокислоты, который протеолитически перерабатывается в лизосомах с образованием четырех гомологичных пептидов сапозина (сапозин A, B, C и D), служащих важными неферментативными активаторными белками для гидролаз сфинголипидов.
• Сапозины способствуют распаду гликосфинголипидов, извлекая липидные субстраты из бислоев мембран и представляя их соответствующим ферментам; сапозин B активирует арилсульфатазу A, бета-галактозидазу и альфа-галактозидазу A, в то время как сапозин C активирует глюкоцереброзидазу, а сапозин D активирует кислую церамидазу.
• Помимо роли лизосомного кофактора, полный просапозин обладает нейротрофическими и миелинотрофическими функциями, передавая сигналы через G-белок-связанные рецепторы GPR37 и GPR37L1, способствуя выживанию нейронов и миелинизации.
• PSAP широко экспрессируется с высокими уровнями в мозге, почках и печени и локализуется преимущественно в просвете лизосом; он также секретируется и обнаруживается во внеклеточных жидкостях, включая спинномозговую жидкость и молоко.
• Мутации в PSAP связаны с различными лизосомными болезнями накопления, включая болезнь Гоше, метахроматическую лейкодистрофию и болезнь Краббе, а также со сложными формами с комбинированным дефицитом сапозинов; полиморфизмы также были связаны с риском болезни Паркинсона.
• Белок содержит множество внутримолекулярных дисульфидных связей и сайтов N-связанного гликозилирования, которые критически важны для его стабильности, процессинга и функциональной активации. Канонический предшественник просапозина имеет расчетную молекулярную массу 58,1 кДа; обширный гликозилирование часто приводит к появлению полос в диапазоне 65–70 кДа при SDS-PAGE.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген соответствует остаткам 275–524 человеческого PSAP, покрывая домены сапозина C и D и C-концевой линкер; полученные поликлональные антитела, как ожидается, будут обнаруживать как полный предшественник, так и, возможно, процессированные фрагменты сапозина C/D.
• Для Вестерн-блоттинга рекомендуется стандартный SDS-PAGE в восстанавливающих условиях; преобладающая полоса около 58 кДа обычно наблюдается в лизатах тканей человека, мыши и крысы, что представляет собой предшественник просапозина. Дополнительные более низкие полосы могут возникать в результате протеолитического процессинга.
• При выполнении иммунофлуоресценции требуется пермеабилизация для доступа к лизосомной локализации; для исследований колокализации рекомендуется совместное окрашивание маркером лизосом (например, LAMP1).
• Для иммуногистохимии на парафиновых срезах retrieval антигена с цитратным буфером (pH 6,0) часто улучшает сигнал; ткани положительного контроля включают мозг (мозжечок, гиппокамп) и почки.
• Это антитело можно использовать в ИФА в качестве реагента для захвата или детекции в сочетании с подходящим моноклональным анти-PSAP антителом; оптимальные разведения и условия анализа должны быть определены эмпирическим путем.

CamelBio: Ваш комплексный мост поставок

CamelBio выступает в качестве интегрированного партнера по поставкам для производителей IVD, предлагая широкий спектр сырья, включая валидированные антитела, такие как это поликлональное антитело против PSAP, подобранные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и услуги по производству кастомных антигенов. Разрабатываете ли вы иммуноанализы для лизосомных болезней накопления или нуждаетесь в специальных реагентах для исследований нейродегенеративных заболеваний, CamelBio оптимизирует ваши закупки от ранней оценки до коммерческого производства серий.