Кроличья поликлональная антитела против POLR2A для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, IP, ELISA - P24928

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация POLR2A

• POLR2A кодирует самую крупную субъединицу (RPB1) ДНК-зависимой РНК-полимеразы II, фермента, ответственного за синтез пре-мРНК и многих некодирующих РНК в эукариотических клетках.
• RPB1 вместе со второй по величине субъединицей RPB2 формирует каталитическое ядро Pol II. Она содержит консервативный мотив DxDGD, который координирует ион Mg²⁺, необходимый для присоединения нуклеотидов во время полимеризации РНК. Связанные ссылки: PMID:30190596, PMID:8381534, PMID:9852112
• Фермент циклически проходит через стадии инициации, элонгации и терминации транскрипции. Во время инициации Pol II рекрутируется на промоторы, содержащие элементы, такие как TATA-бокс или CpG-островки. Связанные ссылки: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:28108474
• RPB1 обладает уникальным C-концевым доменом (CTD), состоящим из 52 гептапептидных повторов. CTD подвергается динамическому фосфорилированию (особенно по Ser-2 и Ser-5) для координации стадий транскрипции и рекрутирования факторов процессинга. Связанные ссылки: PMID:24207025, PMID:26124092
• Помимо своей ДНК-зависимой РНК-полимеразной активности, POLR2A может действовать как РНК-зависимая РНК-полимераза, удлиняя некодирующие РНК и опосредуя репликацию вируса гепатита дельта.
• Белок локализуется преимущественно в ядре, но также обнаруживается в цитоплазме и ассоциируется с хромосомами во время митоза.
• Мутации в POLR2A связаны с нарушениями нейроразвития, включая умственную отсталость (NEDHIB), что подчеркивает его важнейшую роль в экспрессии генов.
• Альтернативный сплайсинг и посттрансляционные модификации (ацетилирование, метилирование, убиквитинирование, фосфорилирование) дополнительно расширяют функциональность и регуляцию POLR2A.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевой области (а.о. 1-260) человеческого POLR2A, которая находится за пределами повторяющегося CTD. Такая конструкция может обеспечивать специфичность к ядру RPB1 по сравнению с высокогомологичным CTD, обнаруженным в некоторых других белках.
• Антитела показали свою работоспособность в Вестерн-блоттинге, IF/ICC, IP и ELISA. При выполнении Вестерн-блоттинга обратите внимание на предсказанную молекулярную массу ~217 кДа; рассмотрите возможность использования геля SDS-PAGE с низким процентом полиакриламида и тщательной оптимизации переноса для такого крупного белка.
• Сообщается о перекрестной реактивности с мышиным и крысиным белком, что предполагает консервативность эпитопа у этих видов. Проведите валидацию в вашей конкретной модельной системе для подтверждения.
• Для IF/ICC ожидается ядерное и перинуклеарное окрашивание, основанное на локализации POLR2A; однако фон может варьироваться в зависимости от условий фиксации и пермеабилизации.
• В экспериментах по IP убедитесь, что лизирующий буфер совместим с экстракцией ядерных белков для эффективного солюбилизации комплексов Pol II.

CamelBio: Ваш универсальный источник поставок

CamelBio поставляет премиальные сырьевые материалы для IVD и техническую поддержку разработчикам диагностических систем и исследовательским лабораториям по всему миру, оптимизируя ваш путь от концепции до клиники. Эти антитела против POLR2A служат универсальным инструментом для изучения РНК-полимеразы II и регуляции транскрипции, дополняя наш портфель валидированных пар антител, объемных вспомогательных реагентов и услуг по разработке настраиваемых моноклональных/поликлональных антител. Нужен ли вам поиск редких мишеней или готовые к использованию критические сырьевые материалы, CamelBio — ваш надежный партнер в ускорении разработки анализов и наборов.