Моноклональное антитело Anti-PMEL (gp100) для Вестерн-блоттинга, ИГХ (парафин), ИФА - P40967

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация PMEL

• Белок меланоцитов PMEL (также известный как gp100, HMB-45 или SILV) является белком премеланосомы, который играет центральную роль в морфогенезе меланосом и пигментации.
• В процессе созревания меланосомы процессированные амилоидогенные фрагменты PMEL собираются в параллельные фибриллярные листы, обеспечивая удлинение премеланосом стадии I в полосатые эллипсоидные меланосомы стадии II.
• В пигментированных меланосомах стадий III и IV амилоидная матрица служит платформой для концентрации предшественников эумеланина, способствуя эффективному синтезу меланина, а также потенциально изолируя токсичные промежуточные продукты реакции.
• PMEL — это хорошо охарактеризованный меланомспецифический антиген; иммунодоминантные пептиды, производные от PMEL, такие как G9-154 (KTWGQYWQV) и G9-209 (ITDQVPFSV), презентируются молекулами HLA-A и стимулируют противоопухолевый ответ цитотоксических T-клеток.
• На субклеточном уровне PMEL локализуется в мембране эндоплазматического ретикулума, аппарате Гольджи, мембране сети цис-Гольджи, эндосомах (мультивезикулярных тельцах) и меланосомах, а также обнаруживается во внеклеточных везикулах и секретируемых формах.
• Белок подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая расщепление по парам основных остатков, образование дисульфидных связей, гликозилирование и добавление сиаловой кислоты.
• В норме экспрессируется на низком уровне в покоящихся меланоцитах взрослого организма, PMEL сверхэкспрессируется в пролиферирующих меланоцитах новорожденных и во время роста опухоли, особенно при меланоме и некоторых диспластических невусах.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевой области (а.о. 25-211) человеческого PMEL, которая, как прогнозируется, является внеклеточной/люминальной; учитывайте это при разработке стратегий детекции или сочетании с другими антителами.
• Для Вестерн-блоттинга полноразмерный необработанный PMEL мигрирует при примерно 70 кДа, но обратите внимание, что эндогенный PMEL протеолитически процессируется в множество фрагментов; подтвердите ожидаемую картину полос в ваших лизатах.
• При иммуногистохимии (парафин) окрашивание PMEL должно быть мембранозным/цитоплазматическим в меланоцитах и клетках меланомы; включите соответствующие положительный (ткань меланомы) и отрицательный контроли.
• Для применения в ИФА используйте рекомбинантный белок PMEL или синтетические пептиды в качестве покрывающих антигенов и тщательно титруйте антитело для достижения оптимального соотношения сигнал/шум.
• Поскольку экспрессия PMEL может варьироваться в зависимости от состояния активации меланоцитов, рассмотрите возможность использования известных линий клеток меланомы (например, SK-MEL-28) или первичных меланоцитов в качестве положительного контроля.

CamelBio: Ваш мост для закупок полного цикла

CamelBio ускоряет разработку вашей диагностики, предоставляя единую платформу для сырья IVD. Нужны ли вам валидированные моноклональные антитела, такие как этот клон anti-PMEL, или вы разрабатываете тесты для маркеров меланомы, мы предлагаем оптимизированные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный поиск редких мишеней. Партнерство с нами позволит оптимизировать ваш путь от идеи до клиники.