Поликлональное антитело против PLK3 для Вестерн-блоттинга, ИФА - Q9H4B4

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация PLK3

• Идентичность белка и семейство: Серин/треонин-протеинкиназа PLK3 (также известная как индуцируемая цитокинами серин/треонин-протеинкиназа, индуцируемая FGF киназа, киназа, связанная с пролиферацией) является членом семейства поло-подобных киназ. Содержит каталитический домен и домены POLO box, которые опосредуют распознавание субстрата через фосфорилирование-зависимое связывание.
• Регуляция клеточного цикла: PLK3 необходима для входа в S-фазу и цитокинеза. Регулирует контрольную точку G2 и митотическое прогрессирование, фосфорилируя CDC25C и BCL2L1, влияя на переходы клеточного цикла.
• Реакция на стресс и повреждение ДНК: PLK3 быстро активируется под действием стрессовых стимулов, таких как ионизирующее излучение, активные формы кислорода (АФК), гиперосмотический стресс, УФ-облучение и гипоксия. Фосфорилирует p53/TP53 для стимуляции апоптоза, CHEK2 для усиления контрольной точки G2/M и p73/TP73 для ингибирования его про-апоптотических функций.
• Ключевые мишени фосфорилирования: Субстраты PLK3 включают ATF2, BCL2L1, CDC25A, CDC25C, CHEK2, HIF1A, JUN, p53/TP53, p73/TP73, PTEN, TOP2A и VRK1. Эти взаимодействия опосредуют ее роль в контроле контрольных точек, апоптозе и динамике аппарата Гольджи.
• Разборка аппарата Гольджи: PLK3 участвует в фрагментации аппарата Гольджи во время митоза через MEK1/MAP2K1-зависимый путь, фосфорилируя VRK1 в аппарате Гольджи, что обеспечивает правильное распределение органелл.
• Субклеточная локализация: PLK3 демонстрирует динамическую локализацию в цитоплазме, ядре, ядрышке, аппарате Гольджи и центросоме, что соответствует ее многофункциональной роли в клеточном цикле и передаче сигналов стресса.
• Экспрессия в тканях и при дифференцировке: Транскрипты высоко детектируются в плаценте, легких, скелетных мышцах, сердце, поджелудочной железе, яичниках и почках; слабо — в печени и мозге. В гемопоэтических клетках PLK3 сильно и специфично экспрессируется в терминально дифференцированных макрофагах. Экспрессия снижена в первичных опухолях легких.
• Посттрансляционные модификации и ключевые слова: PLK3 классифицируется как фосфопротеин (протеомная идентификация) с АТФ-связывающей, серин/треонин-протеинкиназной активностью. Ключевые слова UniProt включают апоптоз, клеточный цикл, повреждение ДНК, аппарат Гольджи и референсный протеом.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 487–646 (С-концевая область), включая часть второго домена POLO box. Эта область может обеспечивать специфичность внутри семейства PLK; перекрестную реактивность с PLK1 или PLK2 при необходимости следует подтверждать экспериментально.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) прогнозируемая молекулярная масса составляет ~72 кДа. Проверяйте детекцию в целевом виде (человек, мышь, крыса) и типе образца. Используйте соответствующие контроли загрузки и рассмотрите возможность использования лизатов с нокдауном (siRNA) или нокаутом для подтверждения идентичности полосы.
• Применения в ИФА можно оптимизировать, тестируя условия иммобилизации и разведения антител; антитело поставляется в виде кроличьего поликлонального, подходящего для стандартных протоколов непрямого ИФА.
• Для изучения путей, индуцированных стрессом, обрабатывайте клетки агентами, повреждающими ДНК (например, этопозид, УФ), индукторами АФК (например, H₂O₂) или миметиками гипоксии (например, CoCl₂) и подтверждайте активацию PLK3 или изменения экспрессии с помощью WB.
• Для иммунофлуоресценции или иммуногистохимии пользователям следует установить условия фиксации и пермеабилизации, совместимые с детектируемыми субклеточными компартментами (цитоплазматический, ядерный, аппарат Гольджи). Учтите, что эндогенные уровни PLK3 могут быть низкими в некоторых типах клеток; может потребоваться обогащение или усиление сигнала.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предлагает это кроличье поликлональное антитело против PLK3 в рамках обширного портфолио сырья для ИВД, поддерживая производителей и исследовательские институты в ускорении разработки тестов для биомаркеров клеточного цикла и онкологии. Благодаря надежным возможностям в области валидированных пар антител, оптимизированных моноклональных/поликлональных антител, объемных вспомогательных реагентов и поиска редких мишеней, CamelBio оптимизирует процесс закупок от ранней концепции до клинического применения. Свяжитесь с нами, чтобы изучить услуги по разработке индивидуальных антител и комплексные решения поставок, адаптированные под потребности вашего диагностического проекта.