Моноклональное антитело против PKA C-alpha (PRKACA) (с валидацией KD) для WB, IF/ICC, ELISA - P17612

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация PKA C-alpha (PRKACA)

• PRKACA кодирует каталитическую альфа-субъединицу протеинкиназы, зависимой от cAMP (PKA), серин/треониновую киназу, которая фосфорилирует многочисленные цитоплазматические и ядерные субстраты, играя центральную роль в каскадах сигнальной передачи cAMP (PubMed:15642694, PubMed:15905176, PubMed:16387847). Связанные ссылки: PMID:15642694 PMID:15905176 PMID:16387847

• Фермент модулирует структуру хроматина и транскрипцию путем фосфорилирования гистона H1.4 и субъединицы p50 NF-kappa-B (NFKB1), влияя на экспрессию генов и активность связывания с ДНК (PubMed:15178447, PubMed:15642694, PubMed:15905176). Связанные ссылки: PMIDID:15178447 PMID:15642694 PMID:15905176

• В тромбоцитах PRKACA фосфорилирует VASP для поддержания циркулирующих тромбоцитов в покоящемся состоянии; при нарушении тромбином или коллагеном свободная активная PRKACA способствует агрегации тромбоцитов (PubMed:15642694, PubMed:20356841). Связанные ссылки: PMID:15642694 PMID:20356841

• PRKACA действует как ключевой ингибитор сигнального пути smoothened, фосфорилируя факторы транскрипции GLI (GLI1, GLI2, GLI3), способствуя их процессингу и предотвращая активацию генов-мишеней в отсутствие лигандов хеджхога (PubMed:16705181, PubMed:36202993, PubMed:39138140). Связанные ссылки: PMID:16705181 PMID:36202993 PMID:39138140

• На внутриклеточном уровне PRKACA локализуется в цитоплазме, ядре, клеточной мембране, митохондриях и специфических выростах, таких как реснички и жгутики, что отражает ее разнообразные регуляторные роли. Экспрессия в тканях специфична для изоформ: изоформа 1 ubiquitous (вездесуща), а изоформа 2 специфична для сперматозоидов и обогащена в пахитенных сперматоцитах.

• Посттрансляционные модификации, включая N-терминальный миристоилирование и фосфорилирование, регулируют ее каталитическую активность, внутриклеточную адресацию и стабильность. Альтернативный сплайсинг приводит к образованию различных изоформ.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Это антитело было получено с использованием рекомбинантного белка PRKACA человека; оно перекрестно реагирует с белками человека, мыши и крысы, что делает его подходящим для исследований на этих видах. Проверьте эндогенные уровни экспрессии в вашей модельной системе перед количественным анализом.
• Для WB ожидаемый молекулярный вес составляет примерно 41 кДа; включите соответствующие положительные и отрицательные контроли (например, лизаты с сверхэкспрессией PRKACA и обработанные siRNA) для подтверждения специфичности полосы.
• Для IF/ICC рассмотрите протоколы фиксации/пермебилизации, сохраняющие антигенность; ожидайте цитоплазматические и ядерные паттерны окрашивания, соответствующие описанной локализации.
• Для ELISA титруйте антитело для оптимального соотношения сигнал/шум и используйте в паре с подходящим вторичным антителом; проверьте работоспособность с использованием рекомбинантного белка или клеточных лизатов.
• Статус валидации KD указывает на то, что специфичность антитела была подтверждена с помощью подходов нокдауна с помощью siRNA или shRNA; рассмотрите возможность включения контролов нокдауна в ваши анализы для дальнейшей проверки зависимости сигнала от экспрессии мишени.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предоставляет производителей диагностических средств и исследовательские лаборатории комплексным портфелем реагентов для IVD, включая валидированные антитела, такие как это моноклональное антитело против PKA C-alpha (PRKACA), для исследований сигнального пути cAMP и киназ. Наше комплексное снабжение служит мостом от концепции к клинике, предлагая оптимизированные пары антител, вспомогательные реагенты в больших объемах и индивидуальный поиск редких целевых реагентов для ускорения разработки ваших анализов и процессов закупок.