Поликлональное антитело против PIWIL1 для Вестерн-блоттинга, иммунофлуоресценции на парафиновых срезах, иммуногистохимии на парафиновых срезах, ИФА - Q9JMB7

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация PIWIL1

• Белок, подобный Piwi 1 (PIWIL1/MIWI), является эндорибонуклеазой, которая играет центральную роль в постнатальных зародышевых клетках, подавляя мобильные генетические элементы, тем самым защищая целостность зародышевой линии. Связанные ссылки: PMID:11578866, PMID:21237665, PMID:22121019

• Как ключевой компонент piRNA-пути, PIWIL1 непосредственно связывает метилированные piRNA с выраженным предпочтением уридина в первой позиции (предвзятость 1U), направляя метилирование и сайленсинг транспозонов. Связанные ссылки: PMID:24757166, PMID:11578866, PMID:21237665, PMID:22121019

• PIWIL1 расщепляет мРНК транспозонов благодаря своей эндорибонуклеазной активности, но не участвует в цикле амплификации piRNA (пинг-понг). Связанные ссылки: PMID:22121019

• Белок локализуется в цитоплазме и демонстрирует тканеспецифичную экспрессию в семенниках (сперматоциты) и головном мозге. В мужских гонадах экспрессия начинается примерно через две недели после рождения, совпадая с началом сперматогенеза.

• PIWIL1 необходим для формирования хроматоидных тел и способствует стабильности определенных miRNA, что предполагает дополнительные регуляторные роли помимо сайленсинга транспозонов. Связанные ссылки: PMID:16787948

• Во время позднего сперматогенеза PIWIL1 секвестрирует RNF8 в цитоплазме; его собственная убиквитинизация и последующая деградация высвобождают RNF8, обеспечивая обмен гистонов на протамины. Связанные ссылки: PMID:28552346

• Ключевые функциональные особенности включают связывание кофактора-иона металла (магний), альтернативный сплайсинг и посттрансляционные модификации (убиквитинирование, метилирование), что классифицирует PIWIL1 как многодоменный регуляторный гидролаз.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (N-концевые аминокислоты 1–160) находится в области, консервативной у человека, мыши и крысы, что согласуется с заявленным профилем перекрестной реактивности; рекомендуется проверить реактивность в вашей конкретной модельной системе.
• Для Вестерн-блоттинга ожидается полоса примерно на 99 кДа. Используйте положительный контроль, например, лизат семенников мыши, и подтвердите наблюдаемую полосу с помощью соответствующего контроля загрузки.
• Для иммунофлуоресцентного детектирования требуется пермеабилизация для доступа к цитоплазматической локализации; совместное окрашивание с маркерами зародышевых клеток (например, DDX4) может помочь подтвердить клеточно-специфичность.
• Для иммуногистохимии на срезах, фиксированных формалином и залитых в парафин, может потребоваться демаскировка антигена; срезы ткани семенника служат подходящим положительным контролем.
• Для применения в ИФА может быть полезно использование пептида или фрагмента белка в качестве иммобилизованного антигена; титруйте концентрации антител для оптимизации соотношения сигнал/шум.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

Как преданный партнер по сырью для IVD, CamelBio упрощает закупки для разработчиков диагностических систем и исследователей, работающих с PIWIL1, piRNA-путём и биологией зародышевых клеток. Мы можем поставлять валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом, а также способствовать поиску сырья для редких мишеней — всё это сопровождается технической поддержкой, необходимой для продвижения ваших проектов от концепции до клиники.