Поликлональные антитела к PI3K p85α/p55γ/p85β для WB, IF/ICC, ELISA - P27986 / O00459 / Q92569

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическое обоснование: функции и локализация PI3K p85α/p55γ/p85β (PIK3R1/PIK3R2/PIK3R3)

• Регуляторные субъединицы PI3K p85α (PIK3R1), p55γ (PIK3R3) и p85β (PIK3R2) являются некаталитическими адаптерами, которые связывают каталитическую субъединицу p110 с активированными рецепторными тирозинкиназами. p85α содержит два SH2-домена и один SH3-домен, связываясь с фосфорилированными остатками тирозина на таких рецепторах, как FGFR, KIT, PDGFR и интегрин β2 (ITGB2), тем самым опосредуя рекрутирование и активацию PI3K на мембране. Связанные ссылки: PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429
• Субъединица p85α играет важную роль в инсулиновой сигнализации, способствуя поглощению глюкозы и синтезу гликогена в тканях, чувствительных к инсулину, а также модулирует клеточный ответ на стресс ЭПР, облегчая ядерную транслокацию изоформы 2 XBP1 при метаболической перегрузке в печени. Связанные ссылки: PMID:20348923
• Эти регуляторные субъединицы существуют в виде нескольких изоформ: PIK3R1 продуцирует изоформы p85α, p55α и p50α посредством альтернативного сплайсинга, тогда как PIK3R2 кодирует p85β, а PIK3R3 кодирует p55γ. Изоформа 2 (p50α) PIK3R1 преимущественно экспрессируется в скелетных мышцах и головном мозге, с более низкими уровнями в почках и сердечной мышце.
• На субклеточном уровне белок p85α локализуется преимущественно в цитоплазме, где он взаимодействует как с рецепторными комплексами, так и с каталитической субъединицей p110.
• Посттрансляционные модификации, включая ацетилирование, фосфорилирование и убиквитинирование, регулируют стабильность и сигнализацию p85α; белок также известен как фактор хозяина при вирусных взаимодействиях (КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ацетилирование, фосфопротеин, Ubl-конъюгация, взаимодействие хозяин-вирус).
• Предсказанная молекулярная масса отражает разнообразие изоформ: p85α и p85β мигрируют при примерно 81–84 кДа, тогда как более короткие изоформы p55γ и p50α обнаруживаются в диапазоне 42–54 кДа.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген был разработан с использованием консервативной пептидной последовательности в пределах аминокислот 400–500, общей для PIK3R1, PIK3R2 и PIK3R3, что позволяет распознавать несколько изоформ регуляторных субъединиц и обеспечивает перекрестную реактивность с образцами человека, мыши и крысы.
• Для вестерн-блоттинга (WB) необходимо подобрать оптимальное разведение первичных антител для вашей конкретной системы образцов; начальный диапазон 1:500–1:2000 часто используется для кроличьих поликлональных антител, однако оптимизация критически важна для четкого разрешения ожидаемых полос при ~42–54 кДа (p55γ/p50α) и ~81–84 кДа (p85α/p85β).
• При проведении иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (IF/ICC) используйте соответствующие контроли (например, неиммунизированный кроличий IgG) и рассмотрите протоколы пермеабилизации, сохраняющие цитоплазматические эпитопы.
• Для ELISA антитела могут использоваться в качестве реагента для захвата или детекции; используйте их в паре с подходящими антителами к каталитической субъединице p110 для создания сэндвич-форматов при изучении динамики взаимодействия PI3K.

CamelBio: Ваш универсальный партнер по снабжению

CamelBio предоставляет производителям IVD и исследовательским лабораториям упрощенный доступ к широкому портфелю валидированных антител и вспомогательных реагентов. Данные поликлональные антитела к регуляторной субъединице PI3K нацелены на ключевые узлы инсулиновой сигнализации и факторов роста, что делает их ценным инструментом для разработки диагностических систем в области метаболических заболеваний, онкологии и исследований клеточной сигнализации. Помимо этого продукта, CamelBio предлагает услуги по контрактному производству больших партий, оптимизированные пары антител и поиск редких видов сырья для поддержки всего вашего рабочего процесса разработки — от начальной оценки осуществимости до клинического применения.