Кроличье поликлональное антитело против PI3 киназы p85 бета для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦХ, ИФА - O00459

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация PI3 киназы p85 бета

• Кодируемый геном PIK3R2, PI3 киназа p85 бета (бета-регуляторная субъединица фосфатидилинозитол-3-киназы) является регуляторной субъединицей класса IA PI3K массой 85 кДа.
• Она ассоциирует с каталитической субъединицей p110, формируя активную PI3K, которая фосфорилирует PtdIns(4,5)P2 с образованием вторичного мессенджера PIP3 в плазматической мембране.
• PIP3 рекрутирует белки, содержащие PH-домен, такие как AKT1 и PDPK1, активируя сигнальные каскады, управляющие ростом, выживанием, пролиферацией, подвижностью и морфологией клеток.
• Через свой SH2-домен p85 бета связывается с фосфорилированными протеин-тирозинкиназами (например, активированными рецепторами факторов роста), функционируя как адаптер для локализации каталитической субъединицы p110 к мембране.
• Показано, что она косвенно регулирует аутофагию (PubMed:23604317). Связанные ссылки: PMID:23604317
• p85 бета способствует ядерной транслокации изоформы 2 XBP1 при ER-стрессе и/или стимуляции инсулином в печени, тем самым способствуя улучшению толерантности к глюкозе.
• Белок содержит SH2- и SH3-домены, фосфорилируется при активации PI3K и может подвергаться конъюгации с убиквитином; мутации связаны с вариантами заболеваний.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевой области (аа 1–85) человеческого p85 бета; эта область может быть менее консервативной, потенциально обеспечивая изоформную специфичность, однако следует учитывать и валидировать возможную перекрестную реактивность с p85 альфа в соответствующей модельной системе.
• Для Вестерн-блоттинга используйте тотальные клеточные лизаты из клеточных линий или тканей человека, мыши или крысы; ожидаемая полоса составляет приблизительно 82 кДа. Рекомендуется использовать положительный контроль (например, лизат HeLa или NIH/3T3).
• Для ИГХ-П и ИФ/ИЦХ может потребоваться оптимизация демаскирования антигена (тепловая обработка в цитратном буфере, pH 6.0) и пермеабилизации (0.1% Triton X-100). Специфичность сигнала следует подтверждать с помощью блокирующего пептида или контроля с нокаутом гена.
• В ИФА это антитело можно использовать в качестве захватывающего или детектирующего реагента; для количественных анализов необходимо его сочетание с подходящим детектирующим антителом против p85 бета.
• Поскольку p85 бета является внутриклеточным белком, экспрессирующимся повсеместно, для ИФ/ИЦХ необходимо обеспечить надлежащую фиксацию и пермеабилизацию, а также рассмотреть возможность совместного окрашивания с маркерами специфических компартментов для подтверждения локализации.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio поддерживает производителей диагностических систем и исследовательские институты, предоставляя комплексную цепочку поставок сырья для ИФА, включая валидированные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты. Это антитело против PI3 киназы p85 бета, нацеленное на ключевой узел сигнального пути PI3K/AKT, доступно на нашей платформе наряду с дополнительными материалами для исследований клеточного роста и онкологических биомаркеров. Используйте экспертизу CamelBio в области поставок для оптимизации закупок реагентов к нишевым мишеням и ускорения разработки анализов от концепции до клинического применения.