Кроличья поликлональная антифосфо-ZAP70 (Y493) антитело для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦХ, ИФА - P43403

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация ZAP70

• ZAP70 (70 кДа белок, ассоциированный с зета-цепью) — это цитоплазматическая тирозинкиназа, необходимая для регуляции адаптивного иммунитета, опосредующая сигнализацию Т-клеточного рецептора (TCR) после презентации антигена (PubMed:7509083). Связанные ссылки: PMID:7509083
• Белок содержит тандем SH2-доменов, которые связывают фосфорилированные ITAM-мотивы на CD3 цепях, снимая аутоингибирование и позволяя LCK-опосредованное фосфорилирование по Tyr493 для полной активации.
• После активации ZAP70 фосфорилирует ключевые адапторные белки LAT и LCP2, запуская нижестоящие каскады, которые регулируют пролиферацию Т-клеток, продукцию цитокинов и реорганизацию цитоскелета.
• ZAP70 участвует в развитии тимоцитов, способствуя выживанию и прогрессии клеточного цикла CD4/CD8 двойных негативных клеток до позитивной селекции.
• Он также вносит вклад в развитие и активацию В-клеток через сигнализацию В-клеточного рецептора, что подчеркивает его более широкую роль в лимфоидной системе.
• Субклеточная локализация в основном цитоплазматическая, с рекрутированием к плазматической мембране после взаимодействия TCR; также участвует в интернализации TCR через CBL-опосредованную убиквитинацию.
• Экспрессируется преимущественно в Т-клетках, натуральных киллерах, ранних тимоцитах и про-/пре-В-клетках; генетические дефекты вызывают тяжелый комбинированный иммунодефицит (ТКИД) и аутоиммунные состояния.
• Посттрансляционные модификации включают фосфорилирование тирозина, ацетилирование и убиквитинацию, критически важные для его динамической регуляции.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Поскольку это фосфо-специфичное антитело, нацеленное на Tyr493, убедитесь, что образцы обработаны ингибиторами фосфатаз во время лизиса, и рассмотрите обработку фосфатазой в качестве негативного контроля.
• Для Вестерн-блоттинга предсказанная молекулярная масса составляет приблизительно 70 кДа; используйте соответствующий процент геля (например, 8-10%) для оптимального разрешения.
• Проверяйте специфичность антитела в вашей модельной системе с помощью конкурентного анализа пептидом или подходов с генетическим нокдауном/нокаутом.
• Для иммуногистохимии (ИГХ-П) может потребоваться демаскировка антигена; протестируйте буферы для демаскировки с pH 6 или pH 9.
• При иммунофлуоресценции (ИФ/ИЦХ) отслеживайте мембранную локализацию после стимуляции; условия пермеабилизации и фиксации должны быть оптимизированы.
• Для ИФА и других применений может потребоваться титрование для определения оптимальной рабочей концентрации.

CamelBio: Ваш универсальный партнер по поставкам

CamelBio — это ваш надежный универсальный партнер по поставкам сырья для ИВД, поддерживающий диагностическое и исследовательское сообщество от концепции до клиники. Это антифосфо-ZAP70 (Tyr493) антитело, нацеленное на ключевой узел в адаптивном иммунитете и сигналинге Т-клеток, является примером нашей способности поставлять валидированные фосфо-специфичные антитела для требовательных применений. Мы также предлагаем комплексные услуги по разработке антител, поставку реагентов оптом и поиск редких мишеней для оптимизации ваших рабочих процессов.