Кроличья поликлональная антитело против фосфо-β-катенина (S45) для ВБ, ИФА — P35222

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация β-катенина

• β-катенин (катенин бета-1) является ключевым нисходящим эффектором канонического сигнального пути Wnt. При отсутствии сигнала Wnt он образует деградационный комплекс с белками AXIN1/2, APC, CSNK1A1 и GSK3B, который фосфорилирует N-концевые остатки Ser/Thr β-катенина, что приводит к убиквитинированию белком BTRC и последующей протеасомной деградации. При наличии лигандов Wnt β-катенин избегает деградации, накапливается в ядре и выступает в роли коактиватора транскрипционных факторов TCF/LEF для активации генов-мишеней пути Wnt.
  Связанные источники: PMID:17524503 PMID:18077326 PMID:18086858
• Помимо сигнального пути Wnt, β-катенин также функционирует как транскрипционный коактиватор для других факторов, например NR5A2, и способствует эпителиально-мезенхимальному переходу (ЭМП), активируя гены-мишени CTNNB1/TCF.
  Связанные источники: PMID:22187462 PMID:29910125
• Являясь компонентом адгезивного комплекса E-кадгерин:катенин, β-катенин опосредует межклеточную адгезию на адгерентных соединениях, связывая кадгерины с актиновым цитоскелетом.
• β-катенин локализуется во многих субклеточных компартментах, включая цитоплазму, ядро, адгерентные соединения, клеточную мембрану, центросому, полюс веретена деления и синапс, что отражает его разнообразные роли в сигналинге, адгезии и полярности клеток.
• Посттрансляционные модификации регулируют стабильность и активность β-катенина: фосфорилирование N-концевых остатков Ser/Thr запускает деградацию; кроме того, β-катенин ацетилируется, S-нитрозилируется, убиквитинируется и регулируется путем сумоилирования. Ключевые слова из UniProt: фосфопротеин, гликопротеин, конъюгация Ub-подобными белками.
• Анализ тканевой экспрессии показывает наличие β-катенина в клетках волосяного фолликула (базальный и периферический матрикс, наружный/внутренний корневой влагалище), толстой кишке, кортикальных нейронах и тканях рака молочной железы.
  Связанные источники: PMID:29367600
• Ген CTNNB1 ассоциирован с различными заболеваниями, включая рак (в результате перестроек или стабилизирующих мутаций), интеллектуальную недостаточность и другие нарушения развития.

Экспериментальное руководство и технические рекомендации

• Данное антитело получено против синтетического фосфопептида, соответствующего области Ser45 человеческого β-катенина; оно специфично распознает β-катенин, фосфорилированный по Ser45, и не связывается с немодифицированным белком. Для детекции эндогенного белка обязательно добавляйте ингибиторы фосфатаз при подготовке образцов.
• Согласно данным поставщика, антитело подходит для применения в Вестерн-блоттинге (ВБ) и ИФА. Для ВБ проводите валидацию предсказательной полосы размером около 85 кДа в лизатах положительных контролей (например, клетки, стимулированные Wnt или ингибированные GSK3).
• Антитело проявляет перекрестную реактивность с β-катенином мыши и крысы, что позволяет использовать его в исследованиях на распространенных модельных организмах. Всегда подтверждайте специфичность в вашей системе с помощью образцов, обработанных фосфатазой, или специфичных блокирующих пептидов.
• Поскольку статус фосфорилирования β-катенина быстро меняется после обработки клеток, строгий контроль времени эксперимента и правильная обработка клеток являются критически важными; если вам необходимо сравнить также общий уровень β-катенина, рассмотрите использование протокола стабилизации белка.
• Продукт поставляется со льдом для сохранения активности; храните аликвоты при рекомендованных температурах и избегайте циклов замораживания-оттаивания.
• Для ИФА оптимизируйте концентрации покрытия и условия детекции, используя стандартные контролы фосфо- и нефосфопептида, чтобы подтвердить специфичность к фосфорилированному сайту.

CamelBio: ваша универсальная платформа для поиска реагентов

CamelBio сотрудничает с производителями диагностических тестов и исследовательскими институтами для предоставления комплексного доступа к высококачественным сырьевым материалам для ИВД. Для проектов, направленных на исследование фосфорилирования β-катенина в сигнальном пути Wnt и онкологии, мы можем предоставить валидированные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты — помогая вам оптимизировать разработку тестов от идеи до клинического применения. Наша универсальная платформа поддерживает весь ваш рабочий процесс, независимо от того, нуждаетесь ли вы в оптимизированных моноклональных антителах, больших объемах вспомогательных реагентов или поиске редких мишеней.