Кроличье поликлональное антитело против фосфо-Syk (Y525/526) для Вестерн-блоттинга и ELISA - P43405

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация SYK

• SYK (Spleen tyrosine kinase, селезеночная тирозинкиназа) — это нерецепторная тирозинкиназа, которая опосредует передачу сигнала нижестоящим от различных трансмембранных рецепторов, регулируя врожденный и адаптивный иммунитет, клеточную адгезию, созревание остеокластов, активацию тромбоцитов и развитие сосудов. Связанные ссылки: PMID:12387735 PMID:33782605
• Необходимая для сигналинга B-клеточного рецептора (BCR), SYK требуется для созревания B-клеток на переходе от про-B к пре-B стадии. Связанные ссылки: PMID:12456653
• При активации BCR, SYK фосфорилирует ключевые адаптеры, такие как BLNK, и эффекторы, такие как PLCG1, связывая активированный рецептор с путями сигналинга, включающими мобилизацию кальция и PKC.
• В системе врожденного иммунитета SYK активируется рецепторами C-типа лектинов (например, CLEC7A) при грибковой стимуляции, запуская продукцию активных форм кислорода (АФК), активацию инфламмасомы и транскрипцию цитокинов, опосредованную NF-κB.
• SYK необходима для стимулированного IL-15 фагоцитоза нейтрофилов, что подчеркивает ее роль в функции миелоидных клеток. Связанные ссылки: PMID:15123770
• На субклеточном уровне SYK локализуется на клеточной мембране, в цитоплазме и цитозоле, динамически перемещаясь к активированным рецепторам.
• Широко экспрессируется в гемопоэтических клетках, с выраженной экспрессией в линиях B-клеток (от про-B до плазматических клеток) и в нейтрофилах. Связанные ссылки: PMID:8163536
• Посттрансляционные модификации включают аутофосфорилирование по остаткам тирозина 525 и 526 в активационной петле, а также убиквитинирование, которые регулируют киназную активность и стабильность белка.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Поскольку это антитело специфично распознает фосфорилирование по Tyr525 и Tyr526, убедитесь, что клеточные лизаты готовятся с ингибиторами фосфатаз для сохранения фосфорилирования. Для Вестерн-блоттинга валидируйте сигнал, обрабатывая образцы лямбда-фосфатазой или сравнивая стимулированные и нестимулированные условия.
• При проведении ELISA рассмотрите возможность использования фосфопептидного антигена для иммобилизации и контрольного нефосфорилированного пептида для подтверждения специфичности к фосфорилированию.
• Оптимальные разведения антител для Вестерн-блоттинга следует определять эмпирически; типичные стартовые разведения для поликлональных антител находятся в диапазоне от 1:500 до 1:2000.
• Перекрестная реактивность с другими видами, основанная на дизайне иммуногена, не ожидается, но экспериментально не подтверждена.

CamelBio: Ваш единый источник поставок

CamelBio предлагает производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям упрощенный доступ к высококачественным сырьевым материалам для IVD, включая такие фосфоспецифичные антитела, как это анти-SYK pAb. Независимо от того, нужны ли вам валидированные пары антител для разработки иммуноанализа, объемные вспомогательные реагенты или помощь в поиске редких целевых реагентов, CamelBio поддерживает ваш проект от концепции до клиники, обеспечивая надежные поставки и техническую экспертизу.