Кроличье моноклональное антитело против фосфо-STAT1 (S727) для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P42224

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация STAT1

• STAT1 (Трансдьюсер сигнала и активатор транскрипции 1) существует в виде двух альтернативно сплайсируемых изоформ, STAT1-альфа (p91) и STAT1-бета (p84), которые различаются своим C-концевым транскрипционной активации.
• Являясь ключевым медиатором интерферонового (IFN) сигналинга, STAT1 фосфорилируется по тирозину в ответ на IFN I типа, гетеродимеризуется с STAT2 и IRF9 с образованием комплекса ISGF3 и индуцирует экспрессию противовирусных генов через ISRE-элементы. Связанные ссылки: PMID:28753426, PMID:35568036
• При стимуляции IFN II типа (IFN-гамма) STAT1 фосфорилируется как по тирозиновым, так и по сериновым остаткам, гомодимеризуется в GAF и связывается с GAS-последовательностями для активации генов-мишеней. Связанные ссылки: PMID:8156998, PMID:26479788
• Сигналинг STAT1 также запускается KITLG/SCF и может участвовать в опосредованных FGFR путях. Связанные ссылки: PMID:15526160, PMID:19088846
• Во врожденном иммунитете эндоцитоз TLR4 при стимуляции LPS приводит к IKBKB-зависимому фосфорилированию STAT1 по Thr-749, что стимулирует транскрипцию ARID5A и IL12B. Связанные ссылки: PMID:32209697
• STAT1 в основном локализуется в цитоплазме, но при активации перемещается в ядро; его внутриклеточный челночный механизм регулируется фосфорилированием и другими посттрансляционными модификациями, включая ацетилирование, метилирование и убиквитинирование.
• Фосфорилирование серина 727 в домене транскрипционной активации имеет решающее значение для максимальной транскрипционной активности, и данное антитело специфически распознает эту модификацию, что позволяет изучать динамику активации STAT1.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический фосфорилированный пептид вокруг Ser727 человеческого STAT1; убедитесь, что подготовка образца включает ингибиторы фосфатаз для сохранения фосфо-эпитопа.
• Для Вестерн-блоттинга ожидайте полосу около 87 кДа; контроль с антителом к нефосфорилированному STAT1 может помочь подтвердить фосфоспецифичность.
• При иммунофлуоресценции (IF/ICC) оптимизируйте условия фиксации и пермеабилизации для баланса между доступностью антигена и сохранением фосфо-эпитопа; фиксация метанолом может быть предпочтительна.
• Для иммуногистохимии (IHC-P) тщательно тестируйте условия демаскировки антигена; рассмотрите возможность использования фосфоспецифичных контролей, таких как обработка лямбда-фосфатазой.
• При использовании ELISA эксперимент по блокированию фосфопептидом может подтвердить специфичность сигнала.
• Указана перекрестная реактивность с STAT1 мыши и крысы; тем не менее, проверяйте работу в вашей конкретной модельной системе из-за потенциальных видозависимых различий в последовательности или динамике фосфорилирования.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio поддерживает производителей диагностических систем и исследователей, обеспечивая комплексный доступ к валидированным IVD-антителам, включая фосфоспецифичные реагенты STAT1 для исследований JAK/STAT сигналинга. Наша платформа комплексных поставок предоставляет пары антител, объемные вспомогательные реагенты и индивидуальные решения по сырью для оптимизации разработки ваших анализов от концепции до клиники.