Кроличья поликлональная антитело против фосфо-SQSTM1/p62 (S349) для Вестерн-блоттинга и ИФА — Q13501

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация SQSTM1/p62

• SQSTM1, также известный как p62, функционирует как молекулярный адаптор для селективной макроаутофагии (агрегагии), связывая полиубиквитинированные белковые агрегаты и аутофагосомы через свои домены UBA и LIR. Связанные публикации: PMID:15340068 PMID:15953362 PMID:16286508
• При связывании с убikвитинированными белками через домен UBA SQSTM1 подвергается жидкостно-жидкостной фазовой сепарации с образованием телец p62, которые затем направляются на аутофагную деградацию. Связанные публикации: PMID:15911346 PMID:20168092 PMID:22017874
• SQSTM1 также выступает в роли сигнального хаба, активируя антиоксидантный ответ NFE2L2/NRF2 путем секвестрации KEAP1 в включительные тела, что способствует накоплению NRF2 в ядре и экспрессии цитопротекторных генов. Связанные публикации: PMID:20452972 PMID:28380357 PMID:33393215
• Субклеточно SQSTM1 локализуется в нескольких компартментах: аутофагосомах, цитоплазматических везикулах, тельцах PML в ядре, поздних эндосомах, лизосомах и саркомерах мышечных клеток.
• Данный белок является фосфопротеином, при этом фосфорилирование по различным остаткам (в том числе по Ser349) влияет на его олигомеризацию, распознавание груза и регуляцию аутофагии.
• Широко экспрессируется во всех тканях, SQSTM1 участвует в развитии нейродегенеративных заболеваний, рака и иммунной сигнализации.
• Он содержит несколько функциональных доменов: PB1 (для полимеризации), цинковый палец ZZ-типа, TB (связывающий домен TRAF6), LIR (область взаимодействия с LC3) и UBA (связывающий убиквитин), что обеспечивает его разнообразные белок-белковые взаимодействия.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический фосфорилированный пептид в области остатка Ser349, что означает, что антитело специфично распознает SQSTM1, фосфорилированный именно по этому сайту. Подтвердите специфичность обработкой фосфатазой или сравнением сигналов в стимулированных и нестимулированных клетках при необходимости.
• Для анализа методом Вестерн-блоттинга используйте восстанавливающий SDS-PAGE гель и добавьте свежие ингибиторы фосфатаз в лизисный буфер для сохранения фосфорилирования. Полоса может наблюдаться в районе 48–62 кДа в зависимости от образца; SQSTM1 часто мигрирует медленнее из-за посттрансляционных модификаций.
• Для применения в ИФА часто требуется оптимизация рН для покрытия планшета и разведения антител. Проверьте линейный диапазон работы антитела с использованием известных конкурентов: фосфорилированного и нефосфорилированного пептидов.
• Заявлена перекрестная реактивность с мышиными и крысиными белками, что делает антитело подходящим для исследований на моделях у грызунов; всегда проводите верификацию в вашей конкретной экспериментальной системе.

CamelBio: ваш единый центр поставки реагентов

CamelBio связывает производителей диагностических тест-систем и исследователей с валидированными исходными материалами для исследований аутофагии и клеточной сигнализации, включая данное фосфоспецифичное антитело к SQSTM1. От моноклональных и поликлональных антител до крупных партий вспомогательных реагентов мы поставляем все компоненты, необходимые для разработки надежных диагностических тестов in vitro. Свяжитесь с нами сегодня, чтобы узнать больше о наших возможностях поставки редких и заказных реагентов для целевых исследований.