Поликлональное кроличье антитело против фосфо-SMO (S611/S615) для ВБ, ИФА — Q99835

Основные характеристики и параметры продукта

Биологические основы: функция и локализация SMO

• SMO (smoothened) — это G-протеин-связанный рецептор и ключевой трансдуктор сигнального пути Hedgehog, необходимый для эмбрионального развития и поддержания гомеостаза тканей у взрослых организмов.
• При отсутствии лигандов Hedgehog SMO ингибируется рецептором патчед (PTCH1/PTCH2), который ограничивает доступ холестерина к SMO; связывание Hedgehog с патчем снимает это ингибирование, позволяя SMO транслоцироваться в первичную ресничку и активироваться под действием холестерина. Связанные публикации: PMID:27437577 PMID:28344083 PMID:32929279
• После активации SMO взаимодействует с G-белком G(i), ингибируя аденилатциклазу и снижая уровень цАМФ; это приводит к дерепрессии протеинкиназы А (PKA), что вызывает стабилизацию и активацию транскрипционных факторов GLI. Связанные публикации: PMID:28344083 PMID:31168089
• Активный SMO также может напрямую ингибировать PKA за счет секвестрации его каталитической субъединицы PRKACA на клеточной мембране, предотвращая фосфориляцию и процессинг транскрипционных факторов GLI. Связанные публикации: PMID:36202993 PMID:39138140
• SMO локализуется преимущественно на клеточной мембране и мембране первичной реснички — ключевом компартменте для сигнализации Hedgehog.
• Антитело специфично распознает фосфориляцию остатков серина 611 и 615 — посттрансляционные модификации, которые, вероятно, влияют на конформацию, активность или траффик SMO.
• Мутации в гене SMO связаны с различными нарушениями развития и онкологическими заболеваниями, что подчеркивает его важную регуляторную роль.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический фосфорилированный пептид, соответствующий области вокруг Ser611/Ser615 человеческого SMO; при вестерн-блоттинге ожидается полоса с молекулярной массой около 86 кДа. Для подтверждения фосфоспецифичности рекомендуется обработка образцов лямбда-фосфатазой или использование неофосфорилированного пептидного конкурента.
• Поскольку состояние фосфорилирования SMO может быть динамическим, рекомендуется добавлять коктейли ингибиторов фосфатаз во время лизиса клеток; также необходимо включать соответствующие положительные и отрицательные контроли (например, клетки, стимулированные Hedgehog, в сравнении с нестимулированными).
• Детекция при вестерн-блоттинге может потребовать оптимизации блокирования и разведения антитела; протестируйте диапазон концентраций и проведите валидацию на клеточных линиях или тканях человека с активным сигнальным путем Hedgehog (например, фибробластах, обработанных SHH).
• Для ИФА антитело может подходить для детекции фосфорилированных пептидов SMO или лизатов клеток; подтвердите связывание с помощью фосфоспецифичного пептида и неофосфорилированного контроля для оценки специфичности.

CamelBio: ваш универсальный поставщик биоматериалов

CamelBio предоставляет диагностическим производителям и исследователям обширный портфель сырья для ИВД, включая это антитело против фосфо-SMO для исследования пути Hedgehog. Помимо отдельных антител, мы предлагаем валидированные антительные пары, оптимизированные моноклональные и поликлональные препараты, вспомогательные реактивы в больших объемах и подбор редких мишеней под заказ. Сотрудничество с нами позволяет упростить путь от идеи до клинического применения за счет надежных и масштабируемых решений по поставке сырья.