Кроличье моноклональное антитело Anti-Phospho-RB1 (S780) для Вестерн-блоттинга, ИФА - P06400

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: функция RB1 и локализация

• Белок, ассоциированный с ретинобластомой (RB1), является ключевым супрессором опухолей и регулятором клеточного цикла, контролирующим переход G1/S и прогрессию G0-G1. Его активность регулируется статусом фосфорилирования.
  Связанные ссылки: PMID:10499802 PMID:15084261
• Гипофосфорилированный RB1 связывается и ингибирует факторы транскрипции E2F, блокируя транскрипцию генов, необходимых для входа в S-фазу. Он как физически маскирует домен трансактивации E2F, так и рекрутирует хроматин-модифицирующие репрессоры.
  Связанные ссылки: PMID:10499802
• RB1 напрямую участвует в формировании и поддержании гетерохроматина, стабилизируя метилирование гистонов, в частности рекрутируя SUV39H1 и KMT5B/C для метилирования H4K20 и обеспечивая конститутивный гетерохроматин.
• Белок также опосредует транскрипционную репрессию через SMARCA4/BRG1, привязывая комплексы гистондеацетилазы (HDAC) к промоторам, таким как c-FOS. В нейронах эта репрессия снимается за счет кальций-зависимой дефосфорилирования RB1.
• Вирусные онкопротеины (крупный Т-антиген SV40, HPV E7, аденовирусный E1A) нацелены на RB1, диссоциируя комплекс RB1-E2F для стимуляции входа клетки-хозяина в S-фазу.
• Внутриклеточно RB1 в основном находится в ядре, где выполняет свои функции регуляции транскрипции, но может также локализоваться в цитоплазме.
• Экспрессируется в сетчатке и кератиноцитах крайней плоти, а также во многих других типах тканей.
  Связанные ссылки: PMID:20940255
• Посттрансляционные модификации включают обширное фосфорилирование (например, в положении S780 циклин-зависимыми киназами), ацетилирование и метилирование, которые совместно модулируют его активность, взаимодействие с белками и стабильность. Ключевые слова включают регулятор хроматина, супрессор опухолей и взаимодействие «хозяин-вирус».

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Это фосфоспецифическое кроличье моноклональное антитело нацелено на сайт фосфорилирования S780 на RB1; обеспечьте статус фосфорилирования образца, обрабатывая клетки соответствующими стимулами (например, стимуляция сывороткой, ингибиторы CDK4/6) и всегда включайте ингибиторы фосфатаз во время лизиса для сохранения эпитопа.
• Для Вестерн-блоттинга ожидаемая полоса составляет ~106 кДа. Проверьте специфичность, используя контроль блокировки нефосфорилированным пептидом, и сравните сигналы в лизатах, обработанных фосфатазой, и необработанных.
• В ИФА рассмотрите возможность использования синтетических фосфорилированных и нефосфорилированных пептидов в качестве покрывающих антигенов для подтверждения селективности к состоянию фосфорилирования.
• Перекрестная реактивность зарегистрирована для человека и крысы; при использовании образцов мыши проверьте гомологию последовательности вокруг S780 и проведите пробный эксперимент.
• Оптимизируйте разведение антитела эмпирически, так как валидированная рабочая концентрация не указана, и всегда включайте положительные (например, пролиферирующие линии раковых клеток) и отрицательные (например, RB1-нулевые или культивируемые без сыворотки) контроли.

CamelBio: Ваш мост для закупок «в одном окне»

Как надежный партнер для диагностических и исследовательских сообществ, CamelBio предлагает упрощенный доступ к обширному портфолио сырья для IVD. Это антитело Phospho-RB-S780 поддерживает исследования клеточного цикла и онкологии, а мы также можем поставить валидированные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и помочь с поиском сырья для редких мишеней, чтобы ускорить разработку ваших анализов от концепции до клиники.