Кроличье поликлональное антитело против фосфо-Raf1 (Ser621) - P04049

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация RAF1

• RAF1, также известный как c-Raf или Raf-1, представляет собой серин/треонин-протеинкиназу, кодируемую геном RAF1. Он функционирует как критическое связующее звено между мембрано-ассоциированными Ras-GTPазами и каскадом сигналинга MAPK/ERK, контролируя ключевые клеточные процессы, такие как пролиферация, дифференцировка, апоптоз и онкогенная трансформация.
• Активированный RAF1 фосфорилирует и активирует дуал-специфичные киназы MAP2K1/MEK1 и MAP2K2/MEK2, которые, в свою очередь, фосфорилируют киназы, регулируемые внеклеточными сигналами, MAPK3/ERK1 и MAPK1/ERK2, передавая сигналы далее по каскаду.
• Помимо канонического пути MAPK, RAF1 фосфорилирует множество других субстратов, включая BAD (по Ser-75), аденилатциклазы (ADCY2, ADCY5, ADCY6), PPP1R12A и TNNT2, что связывает его с разнообразными клеточными функциями, такими как регуляция апоптоза и сигналинг cAMP.
• RAF1 локализуется в цитоплазме, клеточной мембране, митохондриях и ядре. Его транслокация в митохондрии позволяет связываться с BCL2 и вытеснять BAD, обеспечивая дополнительный антиапоптотический механизм.
• В скелетных мышцах изоформа 1 RAF1 присутствует в большем количестве, чем изоформа 2, что указывает на тканеспецифичные регуляторные роли.
• RAF1 является протоонкогеном, вовлеченным в различные виды рака; его нарушенная активность способствует онкогенной трансформации, частично за счет репрессии белков плотных контактов, таких как окклюдин, через активацию SNAI2/SLUG.
• Белок содержит цинк-пальцевый домен и подвергается множественным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование, которые строго регулируют его киназную активность и внутриклеточное распределение.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Данное антитело получено против синтетического фосфорилированного пептида, соответствующего Ser621 человеческого RAF1. Ожидается, что оно специфично распознает фосфорилированный RAF1 по этому остатку. Для детекции общего RAF1 может потребоваться пан-специфичное антитело в качестве контроля.
• Для вестерн-блоттинга используйте стандартные протоколы, но убедитесь, что ингибиторы фосфатаз включены в буферы для лизиса и инкубации для сохранения фосфорилирования. Ожидается детекция полосы около 73 кДа в соответствующих образцах человека.
• Для иммунопреципитации оптимизируйте концентрацию антитела и время инкубации для вашей экспериментальной системы. Рекомендуется предварительная очистка и соответствующие изотипические контроли.
• Для ELISA данное антитело может быть использовано для захвата или детекции; валидируйте аффинность связывания и специфичность с помощью фосфорилированных и нефосфорилированных пептидных контролей.
• Всегда валидируйте антитело в вашей конкретной матрице образца и экспериментальных условиях; производительность может варьироваться в зависимости от типа клеток и статуса стимуляции.

CamelBio: Ваш мост к комплексным решениям

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и исследовательским институтам всесторонний доступ к сырьевым материалам для IVD, включая валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные антитела, а также вспомогательные реагенты для разработки тест-систем. Для исследователей, изучающих путь MAPK или онкогенную сигнализацию, мы предлагаем надежные антитела, такие как это фосфоспецифичное поликлональное антитело к RAF1 (Ser621), наряду с оптовыми поставками и индивидуальной поддержкой для оптимизации вашего проекта от концепции до клинического применения. Позвольте CamelBio стать вашим мостом для всех ваших потребностей в сырьевых материалах для IVD.