Поликлональные антитела к Anti-Phospho-POLR2A CTD-S2 для WB, IP, ELISA - P24928

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: POLR2A (субъединица RPB1 РНК-полимеразы II, направляемой ДНК) Функция и локализация

• POLR2A кодирует самую большую и каталитическую субъединицу РНК-полимеразы II (Pol II), ДНК-зависимой РНК-полимеразы, ответственной за синтез предшественников мРНК и многих функциональных некодирующих РНК (PubMed:23748380, PubMed:27193682, PubMed:30190596, PubMed:28108474). Связанные ссылки: PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596 PMID:28108474
• Вместе со второй по величине субъединицей POLR2B она образует активный центр Pol II, добавляя нуклеотиды к растущей РНК и обеспечивая корректировку с помощью 3'->5' экзонуклеазной активности (PubMed:30190596, PubMed:8381534, PubMed:9852112). Связанные ссылки: PMID:30190596 PMID:8381534 PMID:9852112
• Уникальный C-концевой домен (CTD) состоит из 52 тандемных гептапептидных повторов (YSPTSPS) и служит динамической платформой для сборки факторов, регулирующих инициацию транскрипции, элонгацию, терминацию и котранскрипционную обработку мРНК. Фосфорилирование по Ser5 способствует выходу с промотера, в то время как фосфорилирование по Ser2 критично для снятия паузы и продуктивной элонгации (PubMed:24207025, PubMed:26124092). Связанные ссылки: PMID:24207025 PMID:26124092
• В дополнение к ДНК-зависимой активности РНК-полимеразы, POLR2A обладает функцией РНК-зависимой РНК-полимеразы, удлиняя некодирующие РНК и участвуя в вирусной репликации, например, с вирусом дельта-гепатита.
• Посттрансляционные модификации POLR2A включают фосфорилирование, ацетилирование, метилирование и убиквитинирование, которые точно настраивают ее активность и взаимодействия.
• POLR2A локализуется преимущественно в ядре, но также может быть обнаружена в цитоплазме и связана с хромосомами, что отражает ее роль в транскрипции и за ее пределами.
• Рассчитанный молекулярный вес составляет приблизительно 217 кДа.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический фосфо-пептид, соответствующий Ser2 повтора CTD человеческого POLR2A; специфичность антител должна быть подтверждена с использованием лизатов, обработанных фосфатазой, или нефосфорилированного блокирующего пептида.
• Для вестерн-блоттинга включайте соответствующие ингибиторы фосфатаз в буферы для лизиса и проб, чтобы сохранить сигнал фосфорилирования.
• При выполнении иммунопреципитации убедитесь, что состав лизирующего буфера сохраняет целостность фосфо-эпитопа; предварительное очищение лизатов может снизить неспецифическое связывание.
• Для ИФА покрытие иммунизирующим фосфо-пептидом и детекция с помощью этих антител могут использоваться для оценки фосфо-специфического связывания; рассмотрите возможность перекрестной реактивности с нефосфорилированными пептидными контролем.
• Эти антитела также могут распознавать другие белки с похожими фосфо-мотивами; провалидуйте в соответствующей системе образцов.

CamelBio: Ваш мост для закупок полного цикла

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств и исследовательским лабораториям упрощенный доступ к премиальным реагентам для IVD, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и поиск редких мишеней. Для инструментов исследования транскрипции и экспрессии генов, таких как эти анти-фосфо-POLR2A антитела, мы предоставляем всестороннюю поддержку закупок для ускорения ваших рабочих процессов разработки и валидации анализов.