Кроличий моноклональный антитело против фосфо-PLK1-T210 для Вестерн-блоттинга и ИФА - P53350

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация PLK1

• Серин/треониновая протеинкиназа PLK1, также известная как polo-like kinase 1 и STPK13, является главным регулятором множества событий во время митоза, включая созревание центросом, сборку веретена, G2/M переход, функцию кинетохора, когезию сестринских хроматид, выход из митоза и цитокинез. Связанные ссылки: PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• В центросоме PLK1 фосфорилирует ключевые субстраты, такие как KIZ, NEDD1 и NINL, способствуя рекрутированию γ-тубулинового кольцевого комплекса и формированию биполярного веретена. Связанные ссылки: PMID:16980960, PMID:19509060, PMID:12852856
• Во время выхода из митоза и цитокинеза PLK1 создает собственные сайты докинга на белках центрального веретена (PRC1, KIF20A/MKLP2) и фосфорилирует ECT2, CEP55 и RACGAP1 для координации образования борозды деления. Связанные ссылки: PMID:12939256, PMID:16247472, PMID:17351640, PMID:19468300, PMID:19468302
• Являясь критическим регулятором контрольной точки G2/M, PLK1 активирует CDK1 путем фосфорилирования CDC25C, циклина B1 и транскрипционного фактора FOXM1, одновременно ингибируя отрицательные регуляторы WEE1 и PKMYT1/MYT1. Связанные ссылки: PMID:11202906, PMID:12447691, PMID:12524548, PMID:19160488
• В кинетохоре PLK1 поддерживает сигнализацию контрольной точки сборки веретена и когезию сестринских хроматид, фосфорилируя BUB1B/BUBR1, FBXO5/EMI1, STAG2/SA2 и SGO1. Связанные ссылки: PMID:15148369, PMID:15469984, PMID:17376779, PMID:18331714
• Помимо митоза, PLK1 участвует в восстановлении после повреждения ДНК и выключении контрольных точек, фосфорилируя MRE11, RAD51, POLQ и RHNO1, а также отрицательно регулирует стабильность p53 через сигнальный путь TOPORS. Связанные ссылки: PMID:18615013, PMID:18662541, PMID:37440612, PMID:37674080, PMID:19473992
• PLK1 локализуется в ядре, центросоме, кинетохоре, веретене и теле деления во время клеточного деления и высоко экспрессируется в плаценте и толстой кишке. Он классифицируется как фосфопротеин и серин/треониновая протеинкиназа, выполняющая роли в клеточном цикле и делении клетки (UniProt KB - P53350).

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Это антитело было получено против синтетического фосфопептида в районе Thr210; таким образом, оно специфически распознает фосфорилированную форму PLK1. Подтвердите специфичность сигнала, обрабатывая лизаты λ-фосфатазой или используя мутанты Thr210, не поддающиеся фосфорилированию.
• Для Вестерн-блоттинга предсказанная молекулярная масса составляет ~68 кДа, но митотический фосфо-PLK1 может демонстрировать сдвиги подвижности. Используйте лизаты клеток, заблокированных в митозе (например, обработка нокодазолом), в качестве положительного контроля и интерфазные клетки в качестве отрицательного контроля.
• В применениях ИФА антитело может служить реагентом для захвата или детекции для количественного определения уровней фосфо-PLK1 (Thr210). Оптимизируйте буфер для покрытия, концентрацию антитела и субстрат детекции для вашего формата планшета.
• Перекрестная реактивность была подтверждена только с человеческим PLK1. При работе с другими видами проверьте гомологию последовательностей вокруг эпитопа Thr210 и экспериментально подтвердите реактивность.
• Для сохранения целостности фосфо-эпитопа обрабатывайте образцы с ингибиторами фосфатаз и избегайте длительного хранения лизатов, обогащенных фосфопротеинами.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств и исследовательским лабораториям бесперебойные поставки высококачественного сырья для IVD, включая это фосфоспецифическое моноклональное антитело против PLK1 (Thr210) для анализов, ориентированных на клеточный цикл и митоз. От валидированных пар антител и объемных вспомогательных реагентов до индивидуального поиска сырья для редких мишеней — мы предлагаем комплексную поддержку для ускорения разработки ваших анализов от концепции до клиники.