Кроличье поликлональное антитело Anti-Phospho-PKC (pan) (gamma)-T514 для Вестерн-блоттинга и ИФА — P17252 / P05771 / Q05655 / Q02156 / P05129 / P24723 / Q04759

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация PKC (pan) (gamma)-T514

• Члены семейства протеинкиназы C (PKC) представляют собой сери/треонинкиназы, активируемые кальцием, диацилглицерином (DAG) и фосфолипидами, которые регулируют разнообразные клеточные процессы, включая пролиферацию, апоптоз, дифференцировку и миграцию.
• PKC альфа (PRKCA), широко экспрессируемая репрезентативная изоформа, участвует как в положительной, так и в отрицательной регуляции клеточного цикла, может способствовать росту клеток через сигнальный путь RAF1/ERK или индуцировать остановку роста с помощью ингибиторов CDK.
• Обладает антиапоптотическими функциями за счет фосфорилирования BCL2 и подавления опосредованной p53/TP53 активации IGFBP3, высоко экспрессируется во многих типах рака, где может действовать как опухолевый промотор.
• Проходит стимул-зависимую транслокацию между цитоплазмой, клеточной мембраной, митохондриальной мембраной и ядром, обеспечивая контекстно-специфическую сигнализацию.
• При изучении сердечной функции PKC альфа регулирует гипертрофию кардиомиоцитов, сократительную способность миокарда и прогрессирование сердечной недостаточности; он фосфорилирует кардиальный тропонин T (TNNT2) для модуляции чувствительности к кальцию.
• При ангиогенезе необходим для миграции эндотелиальных клеток, адгезии к витронектину и сигналинга, индуцированного VEGFA, стабилизируя мРНК VEGFA на посттранскрипционном уровне.
• Это антитело специфично распознает белки PKC, фосфорилированные по консервативному остатку треонина 514 (T514 в PKC альфа; эквивалентные сайты активационной петли в изоформах бета, дельта, эпсилон, гамма, эта и тета), который критически важен для полной киназной активности.
• Фосфорилирует KLHL3 по Ser-52 в ответ на сигнализацию ангиотензина II, снижая взаимодействие между KLHL3 и WNK4. Связанные источники: PMID:25313067
• Фосфорилирует DOCK8, что приводит к его диссоциации от LRCH1 и последующей активации ГТФазы CDC42 во время хемокин-индуцированной миграции Т-клеток. Связанные источники: PMID:28028151
• Фосфорилирует LRRK1, которая в свою очередь фосфорилирует белки RAB, участвующие во внутриклеточном транспорте. Связанные источники: PMID:36040231

Рекомендации по проведению экспериментов и технические подсказки

• Иммуногеном служит синтетический фосфорилированный пептид, соответствующий области вокруг T514 человеческой PKC альфа; такая конструкция позволяет нацеливаться на фосфориляционно-специфический эпитоп у нескольких изоформ PKC одновременно.
• Для Вестерн-блоттинга добавляйте ингибиторы фосфатаз в буферы для лизиса и отмывки, чтобы сохранить фосфорилирование, а также рекомендуется использовать блокирующие растворы на основе БСА для снижения неспецифического связывания.
• ИФА-определение можно проводить с лизатами клеток или тканей; оптимизируйте условия покрытия и детекции для фосфопротеинов, проверяйте специфичность с помощью контролей нефосфорилированного пептида.
• Поскольку антитело распознает несколько изоформ PKC, изоформно-специфические ответы следует верифицировать с использованием соответствующих нокаутных клеточных линий или изоформ-селективных ингибиторов.
• Предполагаемая молекулярная масса полос может находиться в диапазоне 59–83 кДа в зависимости от изоформы; подтвердите молекулярную массу в вашей системе исследования.

CamelBio: ваша универсальная платформа для поиска реагентов

CamelBio предоставляет это кроличье поликлональное антитело к Phospho-PKC (pan) (gamma)-T514 как часть нашего обширного портфеля сырья для ИВД для исследований сигнальных путей киназ и заболеваний. Мы специализируемся на поставке валидированных пар антител, оптимизированных моноклональных и поликлональных антител и объемных вспомогательных реагентов, упрощая разработку продукта от идеи до клинических испытаний. Наша универсальная платформа обеспечивает доступ к сырью для редких мишеней и технические консультации, поддерживая производителей диагностических тест-систем и исследовательские лаборатории по всему миру.