Моноклональное антитело против фосфо-p38 MAPK (T180) для WB, IHC-P, ELISA - Q16539 / P53778 / Q15759

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 (p38 альфа) — это серин/треониновая киназа и ключевой компонент пути передачи сигналов MAP киназ, реагирующий на стрессовые стимулы и провоспалительные цитокины; это один из четырех членов семейства p38 MAPK, и предполагается, что у каждой киназы около 200–300 субстратов.
• Киназа быстро активирует нижестоящие киназы, включая MAPKAPK2/MK2 и MAPKAPK3/MK3, которые регулируют экспрессию генов посттранскрипционно, фосфорилируя РНК-связывающие белки, такие как ZFP36 и ELAVL1, и модулируя фактор элонгации трансляции EEF2K.
  Связанные ссылки:
  PMID:11154262
• В ядре p38 MAPK фосфорилирует факторы транскрипции (ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, MEF2, p53 и др.) и ремоделеры хроматина, обеспечивая быструю индукцию генов немедленного раннего ответа и воспалительных генов; фосфорилирование гистона H3 (Ser‑10) с помощью MSK1/2 способствует рекрутированию NF‑κB.
  Связанные ссылки:
  PMID:9687510
  PMID:9792677
  PMID:10330143
  PMID:9430721
  PMID:9858528
• Киназа перемещается между цитоплазмой и ядром и участвует в различных клеточных процессах: она регулирует оборот белков (например, стабильность CFLAR, SIAH2-опосредованную деградацию EGLN3), аутофагию (транспорт ATG9), эндоцитоз рецепторов (EGFR через эффекторы RAB5A) и отщепление эктодоменов (фосфорилирование ADAM17).
  Связанные ссылки:
  PMID:17003045
  PMID:19893488
  PMID:16932740
  PMID:20188673
• MAPK14 подвергается фосфорилированию по Thr‑180 и Tyr‑182 в активационной петле — двойное событие, необходимое для активности киназы; дополнительные посттрансляционные модификации включают ацетилирование и убиквитинирование, как указано в ключевых словах UniProt.
• Белок широко экспрессируется, с наибольшим уровнем в мозге, сердце, плаценте, поджелудочной железе и скелетных мышцах; более низкая экспрессия наблюдается в легких, печени и почках.
• Альтернативный сплайсинг порождает изоформы, такие как MXI2 (реагирующая на митогены и окислительный стресс) и EXIP (участвующая в раннем начале апоптоза), которые демонстрируют различные предпочтения к субстратам и результаты сигналинга.
• В ответ на повреждение ДНК MAPK14 фосфорилирует CDC25B/C, что приводит к остановке в фазе G2, и TIAR, стабилизируя мРНК GADD45A; она также активирует инфламмасому NLRP1 после УФ‑B облучения или столкновений рибосом.
  Связанные ссылки:
  PMID:11333986
  PMID:20932473
  PMID:35857590

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует фосфорилированному пептиду вокруг Thr‑180; следовательно, антитело в основном детектирует активированный (фосфорилированный) p38 MAPK. Для проверки рассмотрите возможность обработки образцов λ-фосфатазой или использования нестимулированных контрольных лизатов для подтверждения фосфо-специфичности в Вестерн-блоттинге.
• Для иммуногистохимии (IHC‑P) демаскировка антигена с помощью микроволновой печи или скороварки может улучшить детекцию фосфо-эпитопов; проверьте специфичность окрашивания, предварительно инкубируя антитело с фосфопептидом, использованным для иммунизации.
• В применениях ELISA это антитело можно использовать в качестве захватывающего или детектирующего реагента для количественного определения активированного p38 в клеточных лизатах; по возможности включите рекомбинантный фосфорилированный белок p38 в качестве контроля для построения калибровочной кривой.
• При анализе нескольких изоформ p38 обратите внимание, что это антитело, вероятно, дает перекрестную реакцию с p38 бета (MAPK11) и гамма (MAPK13) из-за высокой гомологии последовательности вокруг Thr‑180; проверьте специфичность к изоформе в соответствующей системе образцов.

CamelBio: Ваш мост к источникам "все в одном"

Будучи надежным B2B-партнером для производителей диагностических средств и исследовательских лабораторий, CamelBio обеспечивает доступ к валидированным парам антител для ИФА, оптимизированным моноклональным и поликлональным антителам, а также к вспомогательным реагентам оптом. Для проектов, нацеленных на пути передачи клеточных сигналов, воспаления или стресс-ответа, мы можем поставить фосфо-специфичные антитела, подобранные пары и сырьевые материалы для редких мишеней, чтобы оптимизировать ваш процесс разработки анализов.