Кроличья поликлональная антифосфо-антитело к NFKB1-S893 для IF/ICC - P19838

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация NFKB1

• NF-κB – плейотропный транскрипционный фактор, регулирующий широкий спектр биологических процессов, включая воспаление, иммунитет, дифференцировку, рост клеток, опухолеобразование и апоптоз; экспрессируется практически во всех типах клеток.
• Ген NFKB1 кодирует белок-предшественник p105, который выполняет двойную функцию: действует как цитоплазматический удерживающий фактор для комплексов NF-κB и подвергается котрансляционному процессингу с образованием активной субъединицы p50.
  Связанные ссылки: PMID:1423592
• Активная субъединица p50 преимущественно гетеродимеризуется с RELA/p65, формируя транскрипционно компетентный комплекс NF-κB, который связывается с консенсусной κB-последовательностью ДНК 5'-GGRNNYYCC-3' в энхансерных областях генов, участвующих в иммунном и острофазовом ответах.
  Связанные ссылки: PMID:1740106, PMID:7830764
• В зависимости от состава димера комплексы NF-κB могут действовать как активаторы транскрипции (например, p65-p50) или репрессоры (например, гомодимеры p50-p50), обеспечивая тонкую регуляцию экспрессии генов.
• В нестимулированных клетках NF-κB удерживается в цитоплазме ингибиторными белками IκB; при активации различными стимулами IκB фосфорилируется и деградирует, что позволяет NF-κB транслоцироваться в ядро.
• Белок NFKB1 подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование, ацетилирование, гидроксилирование, S-нитрозилирование и убиквитинирование, которые регулируют его активность, стабильность и взаимодействия с белками.
• Фосфорилирование по серину 893 (S893) происходит в C-концевом, IκB-подобном домене p105 – области, которая обычно удаляется в ходе протеасомного процессинга до p50, что предполагает регуляторную роль в цитоплазматическом удержании или динамике процессинга p105.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический фосфопептид, соответствующий участку вокруг S893 белка NFKB1 человека, что указывает на специфическое распознавание антителом фосфорилированной формы NFKB1 по этому сайту.
• Для иммуноцитохимии/иммунофлуоресценции (ICC/IF) рекомендуем использовать соответствующие протоколы фиксации и пермеабилизации, которые сохраняют состояние фосфорилирования. Фиксация метанолом или параформальдегидом может быть подходящей; однако протестируйте с ингибиторами фосфатаз и без них.
• Проверьте специфичность антитела, предварительно инкубируя его с фосфопептидным иммуногеном или обрабатывая клетки фосфатазой перед окрашиванием.
• Обратите внимание, что сайт фосфорилирования S893 находится в C-концевом IκB-подобном домене p105. Этот домен деградирует в ходе протеасомного процессинга, который генерирует зрелую субъединицу p50. Следовательно, ожидается, что антитело будет детектировать фосфорилированный p105 (~105 кДа), а не продукт расщепления p50.
• Поскольку перекрестная реактивность продемонстрирована только для человека, валидируйте антитело на соответствующих клеточных линиях или тканях человека. Уровни экспрессии могут варьироваться в зависимости от типа клеток и условий стимуляции.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio выступает в качестве партнера для комплексных поставок производителей диагностических средств и исследовательских лабораторий, обеспечивая всесторонний доступ к сырьевым материалам для IVD, включая валидированные фосфоспецифичные антитела, вспомогательные реагенты оптом и поставки редких мишеней. Кроличье поликлональное антитело Phospho-NFKB1-S893 расширяет наше предложение для сигнального пути NF-κB – критической оси в исследованиях воспаления и иммунологии. Обладая глубоким опытом в разработке антител и управлении цепочками поставок, CamelBio поддерживает ваш проект от концепции до клиники.