Кроличья поликлональная антитела против фосфо-NF-κB2-S866 для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦХ, ИФА - Q00653

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация NF-κB2 p100/p52

• NF-κB2 кодирует белок-предшественник p100, который подвергается протеолитическому процессингу с образованием активной субъединицы p52; также экспрессируется изоформа p49. p100 может удерживать комплексы NF-κB в цитоплазме.
• NF-κB – плейотропный транскрипционный фактор, регулирующий воспаление, иммунитет, дифференцировку клеток, рост, опухолеобразование и апоптоз.
• p52 образует гомо- или гетеродимеры с другими членами семейства NF-κB/Rel (RELA/p65, RELB, NFKB1/p50, REL) и связывается с консенсусной последовательностью κB 5'-GGRNNYYCC-3' в энхансерах генов-мишеней.
• Гетеродимерный комплекс RelB-p52 функционирует как транскрипционный активатор, в то время как гомодимер p52-p52 действует как репрессор.
• В неканоническом пути NF-κB гомодимер CHUK/IKKA, активируемый MAP3K14, фосфорилирует p100, ассоциированный с RelB, что запускает убиквитин-зависимый процессинг до p52 и транслокацию в ядро.
• NF-κB2 локализован как в цитоплазме, так и в ядре, причем его активность строго контролируется субклеточной компартментализацией и посттрансляционными модификациями (фосфорилирование, убиквитинирование).
• p52 совместно с RELB регулирует циркадные ритмы, репрессируя транскрипционную активаторную активность гетеродимера CLOCK-BMAL1.
• Хромосомные перестройки, затрагивающие NFKB2, ассоциированы с некоторыми лимфоидными злокачественными новообразованиями.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический фосфопептид, охватывающий Ser866; таким образом, ожидается, что антитело будет специфично распознавать NF-κB2 только при фосфорилировании по этому остатку. Используйте ингибиторы фосфатаз во время подготовки образцов для сохранения фосфорилирования.
• Для Вестерн-блоттинга предсказанная молекулярная масса p100 составляет ~97 кДа; однако могут наблюдаться множественные полосы из-за промежуточных продуктов процессинга или деградации. Рекомендуется включать соответствующие положительные и отрицательные контроли (например, лизаты, обработанные фосфатазой).
• Для иммуногистохимии (ИГХ-П) и иммунофлуоресценции (ИФ/ИЦХ) может потребоваться оптимизация этапов демаскировки антигена, пермеабилизации и блокирования. Работоспособность антител должна быть валидирована в соответствующей ткани или клеточной системе.
• В применениях ИФА фосфоспецифичные антитела можно использовать в паре с захватывающими антителами, распознающими общий NF-κB2, для количественного определения уровня фосфорилированного белка.
• Заявлена перекрестная реактивность с мышиным белком, но реактивность с другими видами не тестировалась; рекомендуется дополнительная валидация при использовании образцов не от человека/мыши.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера «все в одном» для закупки сырья для ИВД, обладая экспертизой в области сигналинга NF-κB и исследований воспаления. Мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и эффективный поиск сырья для редких мишеней. Независимо от того, нужны ли вам эти антитела против фосфо-NF-κB2-S866 для разработки анализов или других критических компонентов ИВД, CamelBio оптимизирует ваши закупки от концепции до клиники.