Анти-фосфо-NF-kB p65/RelA-T435 поликлональные антитела кролика для WB и ELISA - Q04206

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация NF-kB p65/RelA

• Кодируемый геном RELA, NF-kB p65 (также известный как RelA) является субъединицей комплекса транскрипционного фактора NF-kB, который играет центральную роль в регуляции иммунного ответа, воспаления, пролиферации клеток и апоптоза.
• NF-kB функционирует как гомо- или гетеродимер; гетеродимер RELA-NFKB1 является наиболее распространенной формой, а гомодимер RELA-RELA также может активировать транскрипцию на промоторах специфических генов-мишеней.
• В нестимулированных клетках димеры NF-kB удерживаются в цитоплазме белками-ингибиторами kB (IkB); при стимуляции IkB фосфорилируется IKK и деградирует, что позволяет NF-kB транслокироваться в ядро и активировать экспрессию генов.
• RELA необходим для экспрессии генов цитокинов в Т-клетках, способствуя адаптивному иммунному ответу. Связанные ссылки: PMID:15790681
• Он был идентифицирован как ключевой транскрипционный фактор, регулирующий интерфероновый ответ во время инфекции SARS-CoV-2. Связанные ссылки: PMID:33440148
• RELA подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование (например, в Thr435), ацетилирование, метилирование и другие, которые модулируют его транскрипционную активность и взаимодействия.
• Белок локализуется преимущественно в цитоплазме в неактивном состоянии и в ядре при активации, где связывается с ДНК и рекрутирует коактиваторы.
• Альтернативный сплайсинг и хромосомные перестановки с участием RELA были связаны с определенными заболеваниями, что подчеркивает его важность как в нормальной физиологии, так и в патологии.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген, использованный для получения этого антитела, представляет собой синтетический фосфорилированный пептид вокруг Thr435, поэтому он специфически распознает фосфорилированную форму p65. Для WB убедитесь, что клеточные лизаты приготовлены с ингибиторами фосфатаз для сохранения состояния фосфорилирования.
• При выполнении ELISA рассмотрите возможность использования как фосфорилированных, так и нефосфорилированных пептидов для проверки фосфоспецифичности антитела.
• Для вестерн-блоттинга ожидается полоса около 60 кДа; провалидацию проведите с использованием положительных контролей с известной активацией NF-kB (например, клетки, обработанные TNF-альфа) и отрицательных контролей (например, необработанные лизаты или лизаты, обработанные фосфатазой).
• Сообщается, что антитела реагируют с образцами человека и мыши; перекрестная реактивность с другими видами должна быть оценена экспериментально при необходимости.
• Оптимизируйте разведение первичных антител в зависимости от вашей системы образцов; типичными начальными точками являются 1:500-1:2000 для WB, но точные условия могут варьироваться.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

• CamelBio выступает в качестве комплексного партнера по реагентам для IVD, поставляя высококачественные антитела, антигены и вспомогательные реагенты для разработки диагностических тестов. Для исследований сигнального пути NF-kB мы предлагаем это фосфоспецифичное антитело RELA вместе с валидированными парами антител и объемными промежуточными продуктами для оптимизации вашего рабочего процесса. С комплексным доступом от концепции до клиники, CamelBio поддерживает ваш проект техническими консультациями и надежным поиском как редких, так и стандартных мишеней.