Кроличьи поликлональные антитела Anti-Phospho-NCF4 (p40-phox) T154 для Вестерн-блота и ИФА - Q15080

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация NCF4/p40-phox

• Ген NCF4 кодирует цитозольный фактор нейтрофилов 4, также известный как p40-phox — важную регуляторную субъединицу комплекса НАДФН-оксидазы фагоцитов.
• Вместе с другими цитозольными факторами p40-phox участвует в сборке и активации ферментного комплекса NOX2, который продуцирует супероксидные анионы для уничтожения микроорганизмов.
• Белок содержит N-концевой PX-домен, который связывает фосфатидилинозитол-3-фосфат, направляя комплекс на фагосомные и эндосомные мембраны.
• Центральный SH3-домен опосредует взаимодействия с другими субъединицами оксидазы, облегчая сборку комплекса.
• Фосфорилирование по треонину 154 критически важно для активации: оно способствует конформационным изменениям и транслокации на мембрану.
• NCF4 экспрессируется исключительно в гемопоэтических клетках и выполняет специализированную функцию в системе врожденного иммунитета.
• Мутации в гене NCF4 ассоциированы с хронической грануломатозной болезнью (ХГБ), которая характеризуется рецидивирующими инфекциями из-за нарушения продукции супероксида.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Подтвердить фосфоспецифичность можно путем предварительной инкубации антитела с нефосфорилированным пептидом или обработки лизата клеток фосфатазой: исчезновение сигнала подтверждает зависимость связывания от фосфорилирования.
• Для Вестерн-блота оптимизируйте разведение антитела с использованием позитивного контроля, например лизата нейтрофилов или клеток линии HL-60, стимулированных форболовым эфиром; добавляйте ингибиторы фосфатаз в буфер для лизиса, чтобы сохранить фосфорилирование.
• В ИФА для оценки специфичности иммобилизуйте фосфорилированный пептид-иммуноген и сравните связывание антитела с нефосфорилированным аналогом.
• Рекомендуется провести десорбцию антител с мембраны и повторное гибридирование с антителами к общему NCF4 для нормализации уровня фосфорилирования по общему количеству белка.

CamelBio: ваш единый центр поиска реактивов

CamelBio — ваш надежный партнер по поиску высококачественного сырья для производства диагностических систем in vitro. Мы предлагаем широкий ассортимент валидированных антител, включая фосфоспецифичные реагенты, такие как это антитело против фосфо-NCF4, для ускорения ваших диагностических и исследовательских программ в области врожденного иммунитета и оксидативного стресса. Наша сеть поставок гарантирует стабильный доступ к оптимизированным парам антител, крупным паркам вспомогательных реагентов и помощь в поиске редких целей — поддерживаем ваши проекты на всех этапах от концепции до клинических исследований.