Анти-фосфо-mTOR-S2448 поликлональные антитела кролика для WB, IF/ICC, ELISA - P42345

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация серин/треонин-протеинкиназы mTOR

• Серин/треонин-протеинкиназа mTOR (MTOR, также известная как FRAP/FRAP1/FRAP2/RAFT1/RAPT1) — это главный регулятор клеточного метаболизма, роста и выживания массой 289 кДа, интегрирующий гормональные сигналы, сигналы о питательных веществах и стрессе. Связанные ссылки: PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926
• MTOR функционирует как каталитическое ядро двух различных комплексов, mTORC1 и mTORC2, которые различаются по составу субъединиц, регуляции сверху и мишеням внизу. Связанные ссылки: PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:18497260
• Активированный mTORC1 стимулирует синтез белка, фосфорилируя EIF4EBP1 для снятия его ингибирующего действия на eIF4E, и фосфорилируя RPS6KB1/2 для стимуляции фосфорилирования рибосомного белка S6 и инициации трансляции. Связанные ссылки: PMID:12087098 PMID:121504925 PMID:12150926 PMID:24403073 PMID:29236692 PMID:18925875
• mTORC1 стимулирует синтез липидов и нуклеотидов, активируя SREBF1/SREBP1 и CAD соответственно, координируя производство макромолекул для роста клетки. Связанные ссылки: PMID:23429703 PMID:23429704 PMID:23426360
• При достаточном количестве питательных веществ mTORC1 подавляет аутофагию, фосфорилируя ключевые регуляторы аутофагии, включая ULK1 (Ser‑758), DAP, RUBCNL и AMBRA1. Связанные ссылки: PMID:32561715 PMID:20537536 PMID:30704899 PMID:23524951 PMID:25438055
• Комплекс mTORC2 фосфорилирует AGC-киназы, включая AKT по Ser‑473, PKC и SGK1, регулируя выживание клеток, пролиферацию и реорганизацию актинового цитоскелета. Связанные ссылки: PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:21376236 PMID:15718470 PMID:24670654
• MTOR динамически локализуется на мембранах лизосом, эндоплазматического ретикулума, аппарата Гольджи, митохондрий и ядра; активация mTORC1 тесно связана с его рекрутированием на поверхность лизосом.
• MTOR широко экспрессируется, с самым высоким уровнем в яичках, и регулируется обширным фосфорилированием, ацетилированием и убиквитинированием.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический фосфопептид, охватывающий Ser‑2448; следовательно, антитела распознают mTOR только при фосфорилировании по этому остатку. Для вестерн-блоттинга обрабатывайте клетки соответствующими стимулами (например, факторами роста, аминокислотами) и включайте ингибиторы фосфатаз в буферы для лизиса для сохранения фосфорилирования.
• Для вестерн-блоттинга белка mTOR массой 289 кДа используйте полиакриламидный гель с низким процентом (например, 6–8%) и увеличенное время переноса. Проверьте эффективность переноса с помощью преокрашенного маркера.
• Для иммунофлуоресценции (IF/ICC) фиксируйте клетки параформальдегидом, соответствующим образом пермеабилизируйте и используйте блокирующий буфер для снижения неспецифического связывания. Подтвердите локализацию совместным окрашиванием с маркерами лизосом, если изучаете активацию mTORC1.
• Применения ELISA могут включать нанесение покрытия пептидом или белком; валидируйте условия анализа (буфер для покрытия, блокирующий агент, разведение антител) в вашей конкретной матрице.

CamelBio: Ваш мост для закупок в одном месте

CamelBio — это надежный партнер по закупке сырья для IVD в одном месте, предоставляющий высококачественные антитела и критические реагенты для каждого этапа разработки диагностических средств. Эти поликлональные антитела к фосфо‑mTOR‑S2448 являются примером нашего обязательства поставлять валидированные инструменты для исследований клеточной сигнализации и онкологии. Помимо отдельных антител, мы предлагаем оптимизированные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный поиск для редких мишеней для оптимизации ваших процессов разработки и производства анализов.