Кроличье моноклональное антитело против фосфо-JNK1/2/3 (T183/T183/T221) для ВБ, ИГХ-П, ИФ/ИКК, ИФА — P45983 / P45984 / P53779

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация JNK1/JNK2/JNK3

• Митоген-активируемая протеинкиназа 8 (MAPK8/JNK1) — это серин/треонинпротеинкиназа, относящаяся к семейству c-Jun N-концевых киназ (JNK), которое также включает MAPK9/JNK2 и MAPK10/JNK3. Эти киназы кодируются генами MAPK8, MAPK9 и MAPK10 соответственно и имеют консервативные сайты фосфорилирования в активационной петле (Thr183 в JNK1/JNK2 и Thr221 в JNK3).
• JNK1 является центральным медиатором пути сигнализации стрессово-активируемых протеинкиназ (SAP/JNK), который стимулируется провоспалительными цитокинами и физическим стрессом. Активированный JNK1 фосфорилирует транскрипционные факторы, включая JUN, JDP2 и ATF2, тем самым регулируя транскрипционную активность AP-1 (PubMed:18307971).
  Связанные источники:
  PMID:18307971
• JNK1 стимулирует апоптоз путем фосфорилирования p53/TP53 и YAP1 (PubMed:21364637). Он также поддерживает выживание эритроидных клеток путем фосфорилирования BAD при стимуляции ЭПО (PubMed:21095239) и опосредует индуцированную голоданием аутофагию через фосфорилирование BCL2 (PubMed:18570871).
  Связанные источники:
  PMID:21364637, PMID:21095239, PMID:18570871
• JNK1 фосфорилирует широкий спектр субстратов, включая CDT1 (PubMed:21856198), HSF4 (PubMed:16581800), SIRT1 (PubMed:17296730), ELK1, ITCH (PubMed:20027304), CLOCK-BMAL1 (PubMed:22441692), NLRP3 (PubMed:28943315) и SIRT6 (PubMed:27568560), что указывает на его участие в репликации ДНК, циркадных ритмах, активации инфламмасомы и клеточных ответах на стресс.
  Связанные источники:
  PMID:21856198, PMID:16581800, PMID:17296730, PMID:20027304, PMID:22441692, PMID:28943315, PMID:27568560
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ JNK1 (альфа-1, альфа-2, бета-1, бета-2) с разной аффинностью связывания с c-Jun и ATF2, при этом все изоформы фосфорилируют субстраты с сопоставимой эффективностью.
• JNK1 локализуется в цитоплазме, ядре и синапсах, что позволяет ему регулировать как ядерную транскрипцию, так и цитоплазматические процессы, например захват синаптических везикул через фосфорилирование SYT4.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Антитело было получено против синтетического фосфопептида, соответствующего области Thr183 человеческого JNK1. Этот остаток в активационной петле (Thr183 в JNK1/JNK2, Thr221 в JNK3) консервативен у всех трех представителей семейства JNK, что объясняет мультиспецифичность, указанную в характеристиках.
• Для вестерн-блоттинга используйте лизирующие буферы с добавлением ингибиторов фосфатаз для сохранения сигнала фосфорилирования. Предсказанная молекулярная масса находится в диапазоне 35–52 кДа, но фактическое положение полос может отличаться из-за экспрессии разных изоформ и посттрансляционных модификаций; проводите валидацию в соответствующей системе образцов.
• При иммуногистохимии и иммунофлуоресценции фосфоспецифическое детектирование может потребовать депарафинизации и снятия маскировки антигена, а также тщательной оптимизации условий фиксации/пермеабилизации. Всегда включайте нефосфорилированный контроль или обработку фосфатазой для подтверждения специфичности сигнала.
• Для применения в ИФА рекомендуется использовать это антитело в паре с захватывающим антителом к общему JNK для количественного определения уровня фосфорилирования относительно общей экспрессии белка.

CamelBio: ваш единый мост для поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям комплексное универсальное решение для закупки высококачественного сырья для ИВД. Для исследований сигнализации стрессово-активируемых киназ это антитело против фосфо-JNK входит в наш расширяющийся портфель валидированных моноклональных и поликлональных антител, вспомогательных реагентов в больших объемах и редкого сырья для достижения целей по изучению таргетных мишеней. Наша команда поддерживает ваш проект от концепции анализа до клинического применения благодаря надежным цепочкам поставок и техническим консультациям.