Поликлональное антитело против фосфо-eIF4EBP1-T36 для Вестерн-блоттинга (WB) и ИФА (ELISA) - Q13541

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация eIF4EBP1

• Белок 1, связывающий фактор инициации трансляции эукариот 4E (eIF4EBP1), также известный как PHAS-I, является ключевым репрессором кэп-зависимой инициации трансляции.
• В гипофосфорилированном состоянии eIF4EBP1 прочно связывается с eIF4E, предотвращая формирование комплекса eIF4F и ингибируя трансляцию.
• Фосфорилирование по множественным сайтам, включая Thr36, приводит к гиперфосфорилированию eIF4EBP1, который диссоциирует от eIF4E, тем самым позволяя трансляции продолжаться.
• eIF4EBP1 интегрирует сигналы от различных факторов роста и гормонов через пути MAP-киназы и mTORC1, регулируя синтез белка в ответ на внешние стимулы.
• Внутриклеточно eIF4EBP1 обнаруживается как в цитоплазме, так и в ядре, перемещаясь между компартментами для регуляции доступности eIF4E.
• Посттрансляционные модификации включают фосфорилирование, ацетилирование и убиквитинирование, которые модулируют его активность и стабильность.
• Являясь критическим узлом в оси сигналинга PI3K/AKT/mTOR, eIF4EBP1 участвует в росте клеток, пролиферации и метаболизме, что делает его биомаркером рака и метаболических нарушений.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Поскольку иммуноген представляет собой специфический к Thr36 фосфопептид eIF4EBP1, проверьте зависимость от фосфорилирования, обрабатывая образцы фосфатазой или используя конкуренцию нефосфорилированным пептидом.
• Для Вестерн-блоттинга может быть обнаружена полоса примерно при 13-15 кДа; обратите внимание, что фосфорилирование часто вызывает появление множественных полос из-за различных состояний фосфорилирования.
• Указана перекрестная реактивность с eIF4EBP1 мыши и крысы; однако, подтвердите гомологию последовательностей в области Thr36 и провалидируйте на соответствующих клеточных линиях или тканях.
• Рассмотрите возможность включения соответствующих положительных контролей, таких как лизаты стимулированных инсулином или клеток сывороткой, для наблюдения сигналов, зависящих от фосфорилирования.
• Для ИФА (ELISA) иммобилизация фосфо-пептида и детекция с помощью вторичного анти-кроличьего антитела могут быть оптимизированы; убедитесь, что этапы блокирования снижают неспецифическое связывание.
• Избегайте циклов замораживания-размораживания и храните антитела надлежащим образом, как указано в условиях доставки в ледяном пакете.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств и исследовательским учреждениям полный доступ к сырью для IVD (in vitro diagnostics), от концепции до клиники. Это антитело против Phospho-eIF4EBP1-T36 поддерживает исследования регуляции трансляции и сигнальных путей mTOR. Помимо этого продукта, CamelBio предлагает валидированные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальные решения по поиску для редких или труднодоступных мишеней.