Кроличье поликлональное антитело Anti-Phospho-eIF4EBP1-S65 для ВБ, ИФА - Q13541

Основные технические характеристики продукта

Биологический контекст: функция и локализация eIF4EBP1

• eIF4EBP1 (связывающий белок 1 фактора инициации эукариотической трансляции 4E), также известный как PHAS-I (фосфорилированный термо- и кислотоустойчивый белок, регулируемый инсулином 1), является ключевым репрессором инициации кеп-зависимой трансляции.
• В гипофосфорилированном состоянии 4E-BP1 конкурирует с eIF4G за связывание с eIF4E, предотвращая сборку комплекса eIF4F и ингибируя трансляцию. Гиперфосфорилирование, например по Ser65, способствует диссоциации от eIF4E, позволяя кеп-зависимой трансляции протекать.
• 4E-BP1 интегрирует сигналы от факторов роста, гормонов и питательных веществ через пути MAP kinase и mTORC1, при этом фосфорилирование опосредованное mTORC1 в нескольких сайтах (включая Thr37/46, Ser65 и Thr70) критически важно для его инактивации.
• 4E-BP1 принадлежит к семейству связывающих с eIF4E белков и имеет консервативный мотив связывания с eIF4E (YXXXXLΦ), который напрямую взаимодействует с дорсальной поверхностью eIF4E.
• Субклеточная локализация преимущественно цитоплазматическая, но 4E-BP1 может перемещаться в ядро, где может регулировать ядерную трансляцию или выполнять другие функции. Динамика фосфорилирования в разных компартментах может отличаться.
• Помимо фосфорилирования, 4E-BP1 подвергается ацетилированию, убиквитинированию (образованию изопептидной связи) и другим посттрансляционным модификациям, которые тонко регулируют его стабильность и активность, поэтому он классифицируется как фосфопротеин и мишень убиквитин-подобной конъюгации.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический фосфорилированный пептид, содержащий Ser65, поэтому ожидается, что реактивность антитела специфична к фосфоформе. Для ИФА рекомендуется предварительная инкубация антитела с нефосфорилированным пептидом для подтверждения фосфоспецифичности.
• При вестерн-блоттинге включите детекцию общего 4E-BP1 (с использованием пан-антитела) для оценки как общего уровня белка, так и статуса фосфорилирования. Добавляйте ингибиторы фосфатаз в буфер для лизиса.
• Антитело распознает 4E-BP1 человека. Эффективность была подтверждена на клеточных линиях и образцах тканей человека; реактивность с другими видами не была описана, поэтому при работе с нечеловеческими образцами рекомендуется провести тестирование перекрестной реактивности.
• Как поликлональное кроличье антитело, требует контроля воспроизводимости между разными сериями; рекомендуется проводить пилотные эксперименты с конкретной серией продукта.

CamelBio: ваш единый центр по закупке реагентов

CamelBio помогает производителям диагностикумов и группам, занимающимся трансляционными исследованиями, получить консолидированный доступ к сырью для ИВД: от валидированных пар антител и оптимизированных фосфоспецифичных антител до крупных партий вспомогательных реагентов. Для исследований сигнального пути mTORC1 и инициации трансляции мы предлагаем высококачественные реагенты, такие как Anti-Phospho-eIF4EBP1-S65, а также услуги по поиску сырья для редких мишеней и технические консультации — мы помогаем оптимизировать разработку от открытия до клинического применения.