Моноклональное антитело против фосфорилированного eIF2α-S51 для WB, ELISA - P05198

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация eIF2α

• Субъединица 1 эукариотического фактора инициации трансляции 2 (eIF2α) является основным компонентом гетеротримерного комплекса eIF2, также известного как eIF-2-alpha, eIF-2A или eIF2-alpha. Вместе с eIF2β и eIF2γ он координирует ранние этапы кэп-зависимого синтеза белка. Связанные ссылки: PMID:16289705
• Он образует тройной комплекс с ГТФ и инициирующей метионил-тРНК, который затем ассоциируется с 40S рибосомной субъединицей, способствуя рекрутированию мРНК для формирования 43S преинициационного комплекса. Последующий гидролиз ГТФ и высвобождение eIF2-ГДФ позволяют формированию 80S комплекса. Связанные ссылки: PMID:16289705
• Фосфорилирование по серину 51 (S51) киназами, активируемыми стрессом (HRI, PKR, PERK, GCN2), превращает eIF2α в глобальный ингибитор трансляции, что является центральным событием в интегрированном стресс-ответе (ISR). Это ослабляет общий синтез белка, одновременно повышая экспрессию избранных мРНК, таких как ATF4 и QRICH1, что позволяет клетке адаптироваться к стрессу. Связанные ссылки: PMID:19131336 PMID:33384352
• Помимо контроля трансляции, фосфорилированный eIF2α способствует PRKN-независимой митофагии, перемещаясь на внешнюю мембрану митохондрий при их повреждении, обеспечивая прямую связь между перепрограммированием трансляции и контролем качества органелл. Связанные ссылки: PMID:38340717
• eIF2α преимущественно локализован в цитоплазме и может концентрироваться в стресс-гранулах при неблагоприятных условиях. Также он локализуется на поверхности митохондрий после индуцированного стрессом фосфорилирования и был обнаружен в цитозоле.
• Этот белок подвергается множественным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование и ацетилирование, которые точно настраивают его активность, внутриклеточную адресацию и взаимодействия.
• Будучи высококонсервативным белком, eIF2α экспрессируется в тканях человека, мыши и крысы, что подчеркивает его важную роль в контроле трансляции и управлении клеточным стрессом.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический фосфорилированный пептид, охватывающий участок S51 человеческого eIF2α (NP_004085.1); таким образом, антитело предназначено для распознавания фосфорилированной формы. Нефосфорилированный eIF2α может не обнаруживаться.
• Для вестерн-блоттинга добавляйте ингибиторы фосфатаз в буферы для лизиса и инкубации для сохранения сигнала фосфорилирования по S51. Проверьте специфичность антитела, обработав образцы λ-фосфатазой или фосфатазой кишечника теленка перед анализом.
• Поскольку фосфорилирование eIF2α часто является быстрым и транзиторным при стрессовых условиях, оптимизируйте время подготовки образцов и протоколы индукции стресса (например, голодание сывороткой, стресс эндоплазматического ретикулума или депривация аминокислот) в соответствующей клеточной системе или ткани.
• Для применения в ELISA рассмотрите возможность использования пары «захват/детекция», дифференцирующей общий и фосфо-eIF2α, если требуется одновременная количественная оценка обеих форм; валидируйте анализ с соответствующими положительными и отрицательными контролем.

CamelBio: Ваш универсальный мост поставок

Как специализированный поставщик реагентов для IVD, CamelBio поддерживает производителей диагностических средств и исследовательские лаборатории комплексным портфелем, включающим валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и поиск редких мишеней на заказ. Это антитело против Phospho‑eIF2α‑S51 дает возможность проводить исследования регуляции трансляции и интегрированного стресс-ответа, а CamelBio обеспечивает надежную цепочку поставок для ускорения разработки ваших анализов от концепции до клиники.