Моноклональное антитело Anti-Phospho-EGFR-Y845 для WB, IF/ICC, ELISA — P00533

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическое обоснование: функции и локализация EGFR

• EGFR (рецептор эпидермального фактора роста), также известный как ErbB-1 или HER1, представляет собой трансмембранную рецепторную тирозинкиназу, принадлежащую к семейству ERBB. Альтернативно сплайсированная изоформа (изоформа 2) может действовать как антагонист действия EGF.
• Являясь рецепторной тирозинкиназой, EGFR связывает различные лиганды семейства EGF и запускает внутриклеточные сигнальные каскады, которые преобразуют внеклеточные сигналы в соответствующие клеточные ответы, включая пролиферацию, дифференцировку и выживание (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960). Связанные ссылки: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960
• Известные лиганды включают EGF, TGFA/TGF-альфа, AREG, эпиген/EPGN, BTC/бетацеллулин, эпирегулин/EREG и HBEGF/гепарин-связывающий EGF (PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029). Связанные ссылки: PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029
• Связывание лиганда индуцирует гомо- и/или гетеродимеризацию рецептора и последующее аутофосфорилирование ключевых цитоплазматических тирозинов. Фосфорилированный тирозин 845 (Y845), расположенный в активационной петле киназного домена, имеет решающее значение для стабилизации активной конформации и повышения каталитической активности.
• Аутофосфорилирование приводит к рекрутированию адаптерных белков, таких как GRB2, активируя многочисленные нижестоящие модули, включая RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC, STATs и, возможно, NF-kappa-B (PubMed:11116146, PubMed:27153536). Связанные ссылки: PMID:11116146 PMID:27153536
• EGFR напрямую фосфорилирует другие белки, такие как RGS16 (активируя его ГТФазную активность) и MUC1 (усиливая его взаимодействие с SRC и бета-катенином) (PubMed:11602604, PubMed:11483589). Связанные ссылки: PMID:11602604 PMID:11483589
• Он положительно регулирует миграцию клеток посредством взаимодействия с CCDC88A/GIV, который удерживает EGFR на клеточной мембране при стимуляции лигандом (PubMed:20462955). Связанные ссылки: PMID:20462955
• EGFR локализуется преимущественно на клеточной мембране, но также обнаруживается в эндоплазматическом ретикулуме, аппарате Гольджи, ядре, эндосомах и может секретироваться в экзосомах. Он экспрессируется повсеместно, при этом изоформа 2 заметно выражена в раковых клетках яичников.
• Помимо своих нормальных физиологических ролей, EGFR действует как рецептор клетки-хозяина для проникновения вируса гепатита С (HCV), опосредуя формирование корецепторного комплекса CD81-CLDN1 и усиливая слияние вирусной мембраны.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Поскольку данное антитело распознает эпитоп, зависящий от фосфорилирования, добавляйте ингибиторы фосфатаз в лизирующие буферы и быстро обрабатывайте образцы при низких температурах, чтобы сохранить сигнал фосфорилирования.
• Для вестерн-блоттинга ожидается появление основной полосы в области 134 кДа. Чтобы подтвердить фосфо-специфичность, рассмотрите возможность обработки клеточных лизатов лямбда-фосфатазой или проведения анализов пептидной конкуренции с использованием нефосфорилированного аналога пептида-иммуногена.
• При иммунофлуоресценции/ICC ожидается преимущественно мембранно-ассоциированный паттерн окрашивания; совместное окрашивание с маркером плазматической мембраны может помочь подтвердить локализацию.
• Для приложений ELISA антитело может использоваться для захвата или детекции фосфорилированного EGFR; условия покрытия и детекции следует оптимизировать эмпирически.
• Валидировано для реактивности с человеком; для других видов необходимо экспериментально проверить гомологию последовательности в области Y845 и перекрестную реактивность.

CamelBio: ваш универсальный мост для поиска и поставок

CamelBio поддерживает производителей диагностических систем, лаборатории и научно-исследовательские институты, предоставляя комплексный доступ к сырью для IVD, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела и необходимые вспомогательные реагенты. Независимо от того, требуется ли вам это антитело к фосфо-EGFR-Y845 для исследования сигнальных путей рака или вам нужны материалы для редких мишеней, CamelBio оптимизирует процесс закупок от концепции до клинического применения. Свяжитесь с нами, чтобы внедрить надежные и высококачественные реагенты в ваш следующий проект.