Кроличья поликлональная антитело Anti-Phospho-EGFR-Y1173 для Вестерн-блоттинга, ИФА - P00533

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация EGFR

• Рецептор эпидермального фактора роста (EGFR) — это рецепторная тирозинкиназа, которая связывает лиганды семейства EGF и активирует множественные сигнальные каскады, включая RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC и STAT модули, регулируя клеточные ответы, такие как пролиферация, миграция и выживание. Связанные ссылки: PMID:27153536, PMID:10805725, PMID:2790960
• При связывании лиганда EGFR подвергается гомо- или гетеродимеризации и аутофосфорилированию по ключевым цитоплазматическим остаткам тирозина, включая Y1173, создавая сайты связывания для адапторных белков, таких как GRB2, которые передают сигнал далее. Связанные ссылки: PMID:12297049, PMID:15611079
• EGFR также может напрямую фосфорилировать субстраты, такие как RGS16 и MUC1, и участвует в сигналинге NF-kappa-B, связывая его с путями, опосредованными G-белковыми рецепторами, и клеточной адгезией. Связанные ссылки: PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:11116146
• Изоформа 2 EGFR может функционировать как антагонист действия EGF и особенно экспрессируется при раке яичников.
• EGFR локализуется в основном на клеточной мембране, но также в эндоплазматическом ретикулуме, аппарате Гольджи, ядре, эндосомах и может секретироваться, что отражает его динамичный транспорт и сигнальные функции.
• Ключевые посттрансляционные модификации включают фосфорилирование (по тирозину, серину, треонину), гликозилирование, убиквитинирование и пальмитоилирование, которые регулируют его активность, стабильность и сети взаимодействий.
• Широко экспрессируясь, EGFR играет роль в развитии, памяти, обучении и болевой сигнализации, а его дисрегуляция связана с различными видами рака.
• EGFR также служит рецептором на клетках-хозяевах для проникновения вируса гепатита C (HCV), способствуя интернализации вируса в гепатоциты.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический фосфопептид, специфичный к Y1173 человеческого EGFR. Для Вестерн-блоттинга рекомендуется использовать фосфоспецифичные лизирующие буферы и ингибиторы фосфатаз для сохранения состояния фосфорилирования во время подготовки образцов.
• Поскольку EGFR сильно фосфорилируется при стимуляции лигандом, обработка клеток EGF перед сбором может усилить детекцию сигнала в WB; наоборот, голодание в сыворотке и/или обработка фосфатазами могут использоваться для проверки фосфоспецифичности.
• Для ИФА рассмотрите возможность использования антитела в сэндвич-формате с антителом к общему EGFR для захвата, чтобы количественно определять уровни фосфо-EGFR в клеточных лизатах или тканевых экстрактах.
• Для подтверждения фосфоспецифичности как в WB, так и в ИФА может быть проведена перекрестная десорбция с нефосфорилированным пептидом.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio поддерживает производителей диагностических систем и исследовательские лаборатории, предоставляя единый доступ к высококачественным сырьевым материалам для ИФА, включая валидированные пары антител, индивидуальные моноклональные/поликлональные антитела и вспомогательные реагенты оптом. Это антитело к Phospho-EGFR-Y1173 служит важным инструментом для исследований сигнальных путей EGFR, часто нарушенных в онкологических и инфекционных исследованиях. Нужны ли вам оптимизированные реагенты для детекции или помощь в поиске сырья для редких мишеней, CamelBio выступает мостом от концепции до клиники, предоставляя экспертную техническую и логистическую поддержку.