Кроличье моноклональное антитело против фосфо-Chk1 (S317) для ВБ, ИФА — O14757

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация Chk1

• Серин/треонин-протеинкиназа (ген CHEK1), существующая в двух изоформах: полноразмерная киназа (изоформа 1) и эндогенная репрессорная изоформа, которая антагонизирует CHK1 и стимулирует переход фаз S в G2/M.
• Необходима для остановки клеточного цикла, опосредованного контрольной точкой, и активации репарации ДНК в ответ на повреждение ДНК или нереплицированную ДНК. Связанные источники: PMID:11535615 PMID:12399544 PMID:12446774
• Фосфорилирует фосфатазы семейства CDC25 (CDC25A, CDC25B, CDC25C) для создания сайтов связывания 14-3-3 и ингибирует их активность, предотвращая активацию CDK-циклина и блокируя прогрессию клеточного цикла. Связанные источники: PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:9278511
• Мечает CDC25A для протеасомной деградации путем фосфорилирования нескольких сериновых остатков (Ser-76, Ser-124, Ser-178, Ser-279, Ser-293), при этом Ser-76 инициирует полиубиквитинирование, опосредованное NEK11. Связанные источники: PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:19734889 PMID:20090422 PMID:9278511
• Фосфорилирует RAD51 по треонину-309, стимулируя его высвобождение из BRCA2 и усиливая ассоциацию с хроматином для облегчения рекомбинационной репарации. Связанные источники: PMID:15665856
• Фосфорилирует TP53 в нескольких С-концевых сайтах, стимулируя ацетилирование, транскрипционную активацию и остановку клеточного цикла. Связанные источники: PMID:10673501 PMID:15659650 PMID:16511572
• Кроме того, фосфорилирует FANCE (репарация сшивок ДНК), TLK1 (сборка хроматина) и другие субстраты для координации поддержания целостности генома. Связанные источники: PMID:17296736 PMID:12660173 PMID:12955071
• Локализуется в ядре, хромосомах, цитоплазме и центросомах; экспрессируется повсеместно с наибольшей концентрацией в вилочковой железе, яичках, тонкой кишке и толстой кишке.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для подтверждения фосфоспецифичности обработайте образцы лямбда-фосфатазой или включите контроль блокады нефосфорилированным пептидом.
• Для Вестерн-блота стимулируйте клетки агентами, повреждающими ДНК (например, этопозидом, УФ-облучением или гидроксимочевиной), чтобы индуцировать фосфорилирование Chk1 по S317 и улучшить детекцию сигнала.
• Валидируйте эффективность антитела в соответствующих клеточных линиях человека и системах анализа, поскольку перекрестная реактивность с другими видами не задокументирована.
• При применении в ИФА используйте подходящие положительные и отрицательные контрольные образцы для обеспечения специфичности к фосфорилированному эпитопу.
• Рекомендуем оптимизировать разведение антитела и условия инкубации под вашу конкретную экспериментальную схему.

CamelBio: ваша универсальная платформа для закупок

CamelBio предоставляет комплексную универсальную платформу закупок сырья для ИВД, специализирующуюся на мишенях, связанных с повреждением ДНК и клеточным циклом, таких как Chk1. Наш портфель включает валидированные фосфоспецифичные антитела, сопряженные пары антител и вспомогательные реагенты для ускорения разработки диагностических препаратов. Благодаря гибким возможностям поставок как крупных партий, так и сырья для редких мишеней, CamelBio поддерживает ваш переход от концепции до клинических исследований.