Моноклональное антитело к фосфо-Chk1 (S280) для WB, ELISA - O14757

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация серин/треонин-протеинкиназы Chk1

• Серин/треонин-протеинкиназа Chk1 (CHEK1) является критически важной киназой для остановки клеточного цикла, опосредованной контрольными точками, и репарации ДНК. Альтернативно сплайсированная изоформа (изоформа 2) действует как эндогенный репрессор изоформы 1, подавляя ее функцию.
• Необходима для ответа на повреждение ДНК: распознает консенсусную последовательность субстрата [R-X-X-S/T] и фосфорилирует CDC25A, CDC25B и CDC25C, создавая сайты связывания 14-3-3, которые ингибируют эти фосфатазы и/или способствуют деградации CDC25A, что приводит к ингибирующему тирозиновому фосфорилированию комплексов CDK-циклин и остановке клеточного цикла. Связанные ссылки: PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:9278511
• Фосфорилирует RAD51 по Thr-309, способствуя его высвобождению из BRCA2 и усиливая ассоциацию с хроматином, тем самым облегчая репарацию ДНК путем гомологичной рекомбинации. Связанные ссылки: PMID:15665856
• Фосфорилирует несколько C-концевых сайтов TP53, усиливая его ацетилирование и активацию для содействия остановке клеточного цикла и подавления пролиферации. Связанные ссылки: PMID:10673501 PMID:15659650 PMID:16511572
• Также фосфорилирует другие субстраты, включая FANCE (репарация межцепочечных сшивок ДНК), TLK1 (сборка хроматина), гистон H3.1 по Thr-11 (эпигенетическое сайленсирование генов), RB1 (способствует взаимодействию с E2F), SPRTN (рекрутирование хроматина) и PABIR1/FAM122A (регуляция контрольной точки G2/M). Связанные ссылки: PMID:17296736 PMID:12660173 PMID:12955071 PMID:17380128 PMID:31316063 PMID:33108758
• Субклеточная локализация включает ядро, хромосомы, цитоплазму и центросомы, что согласуется с его ролью в передаче сигналов контрольных точек, репарации ДНК и регуляции клеточного цикла.
• Экспрессируется повсеместно, с наиболее высокими уровнями в тимусе, яичках, тонкой и толстой кишке.

Руководство по экспериментам и технические советы

• Иммуногеном является фосфопептид, окружающий Ser280 человеческого Chk1. Антитело разработано специально для распознавания фосфорилированной формы. Подтвердите специфичность, сравнив сигналы в образцах, обработанных фосфатазой, и необработанных образцах, или используя нефосфорилированный блокирующий пептид.
• Для вестерн-блоттинга рекомендуется использовать соответствующие ингибиторы фосфатаз во время подготовки образцов для сохранения сигнала фосфорилирования. Ожидается полоса около 54 кДа для Chk1.
• В ELISA рассмотрите возможность использования связанного с планшетом фосфопептида и нефосфорилированного пептидного контроля для подтверждения фосфо-специфичности.
• Фосфорилирование Chk1 по Ser280 индуцируется повреждением ДНК. Стимуляция клеток агентами, повреждающими ДНК (например, УФ, гидроксимочевина), может усилить детекцию в соответствующих клеточных линиях.

CamelBio: Ваш универсальный партнер по поиску и закупкам

CamelBio — это специализированный универсальный партнер по поиску сырья для IVD, поддерживающий производителей диагностических систем, лаборатории и научно-исследовательские институты от концепции до клиники. Данное антитело к фосфо-Chk1 (S280) отвечает ключевым потребностям в исследованиях клеточного цикла и повреждений ДНК, а CamelBio предлагает полный портфель валидированных пар антител, оптимизированных моноклональных/поликлональных антител, вспомогательных реагентов и поиск редких целевых материалов. Свяжитесь с нами, чтобы оптимизировать ваши закупки и ускорить разработку анализов нового поколения.