Кроличий поликлональный антитело против фосфо-BRD4 (Ser1070) для Вестерн-блоттинга, ИФА - O60885

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция BRD4 и локализация

• BRD4 (белок, содержащий бромодомен 4), также известный как HUNK1, является «ридером» хроматина, который связывается с ацетилированными гистонами и передает эпигенетическую память при делении клеток. Он остается ассоциированным с хроматином на протяжении всего клеточного цикла, помогая поддерживать структуру хроматина и обеспечивая постмитотическую транскрипцию (PubMed:20871596, PubMed:23086925, PubMed:23317504, PubMed:22334664, PubMed:23589332). Связанные ссылки: PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504 PMID:22334664 PMID:23589332

• Он рекрутирует комплекс P-TEFb к промоторам и энхансерам, способствуя фосфорилированию C-концевого домена (CTD) РНК-полимеразы II по Ser2 и облегчая элонгацию транскрипции. JMJD6 взаимодействует с BRD4 для вытеснения отрицательных регуляторов, таких как HEXIM1 и 7SK яРНК (PubMed:16109376, PubMed:16109377, PubMed:19596240). Связанные ссылки: PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240

• BRD4 распознает ацетилированный RELA, что приводит к рекрутированию P-TEFb и активации сигналинга NF-kappa-B (PubMed:19103749). Связанные ссылки: PMID:19103749

• После фосфорилирования CK2, BRD4 рекрутируется к промоторам-мишеням p53/TP53 и регулирует p53-зависимую транскрипцию (PubMed:23317504). Связанные ссылки: PMID:23317504

• В реакции на повреждение ДНК BRD4 функционирует как изолятор хроматина, рекрутируя комплекс конденсина-2 к ацетилированным гистонам, ограничивая распространение фосфорилирования H2AX и модулируя сигналинг.

• BRD4 преимущественно локализуется в ядре и на хромосомах, что согласуется с его ролью в регуляции хроматина. Он экспрессируется повсеместно и подвергается различным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование и ацетилирование.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для поддержания фосфорилирования BRD4 по Ser1070 во время подготовки образцов добавляйте ингибиторы фосфатаз в лизисные буферы и избегайте длительной инкубации при комнатной температуре.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) прогнозируемая молекулярная масса BRD4 составляет 152 кДа; подтвердите идентичность полосы с использованием соответствующих положительных и отрицательных контролей (например, лизатов, обработанных фосфатазой).
• В экспериментах ИФА следует использовать контроли фосфорилированного и нефосфорилированного пептидов для проверки специфичности антитела к фосфо-эпитопу.
• Оптимизируйте разведение антитела и условия инкубации эмпирическим путем; типичные начальные разведения для WB составляют от 1:500 до 1:2000.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio — это надежный партнер по сырью для IVD, предоставляющий комплексный доступ к валидированным антителам, реактивам оптом и услугам по индивидуальному поиску для исследований хроматина и транскрипции. Нужны ли вам фосфоспецифические антитела, подобные этому продукту против BRD4 (pS1070), пары подобранных антител или редкие реагенты к мишеням, наша команда поддерживает разработчиков диагностических средств и лаборатории от концепции до клинического применения.