Анти-фосфо-AKT1 (Ser473) кроличья поликлональная антитело для Вестерн-блоттинга, ИФА - P31749

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация AKT1

• AKT1 (RAC-альфа серин/треонин-протеинкиназа, также известная как PKBα) — это серин/треонин-протеинкиназа, принадлежащая к семейству AKT, которое у человека включает три тесно связанных изоформы (AKT1, AKT2, AKT3), контролирующих метаболизм, пролиферацию, выживаемость, рост и ангиогенез. Связанные ссылки: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136

• Она функционирует ниже по потоку от PI3K и транслирует сигналы от инсулина, IGF1, EGF и PDGF; она фосфорилирует более 100 downstream-мишеней, включая GSK3, TSC2, факторы транскрипции FOXO и компоненты пути mTORC1, тем самым координируя метаболизм глюкозы, синтез белка и экспрессию генов. Связанные ссылки: PMID:12176338, PMID:12964941, PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:21432781

• Фосфорилирование TSC2 в положениях Ser939 и Thr1462 под действием AKT1 снимает ингибирование mTORC1, стимулируя рост клеток и синтез белка; напротив, AKT1 фосфорилирует и ингибирует GSK3α/β, способствуя синтезу гликогена и прогрессированию клеточного цикла. Связанные ссылки: PMID:12150915, PMID:12172553

• AKT1 способствует выживанию клеток, фосфорилируя и инактивируя про-апоптотические белки, такие как BAD (Ser136) и MAP3K5/ASK1 (Ser83), а также активируя CREB1 для повышения экспрессии анти-апоптотических белков BCL2 и MCL1. Связанные ссылки: PMID:10926925, PMID:11154276, PMID:9829964

• Она регулирует динамику цитоскелета и миграцию клеток, фосфорилируя субстраты, такие как палладин (PALLD) и SPATA13, влияя на обновление адгезий и подвижность. Связанные ссылки: PMID:20471940, PMID:19934221

• AKT1 локализуется в цитоплазме, ядре, плазматической мембране и межмембранном пространстве митохондрий. Она экспрессируется повсеместно, при этом повышенные уровни фосфо-Ser473 наблюдаются при раке предстательной железы и молочной железы, что связывает ее с онкогенной сигнализацией.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Антитело получено против синтетического фосфорилированного пептида, соответствующего остаткам в области Ser473 человеческого Akt1; для подтверждения специфичности фосфорилирования рассмотрите возможность использования лизатов, обработанных фосфатазой, или нефосфорилированного антитела к AKT1 в качестве отрицательного контроля.
• При Вестерн-блоттинге ожидайте одну полосу на уровне ~56 кДа; используйте соответствующие положительные контроли (например, лизаты клеток, стимулированных инсулином или EGF) и оптимизируйте количество загружаемого белка и время экспозиции.
• Для ИФА покрытие пластин фосфо-пептидом и нефосфорилированным пептидом может помочь оценить специфичность связывания с фосфорилированной формой; включите этапы блокировки и отмывки для снижения неспецифического фона.
• Перекрестная реактивность указана для человека, мыши и крысы; однако рекомендуется проведение валидации в соответствующей матрице образцов каждого вида.
• Поскольку антитело распознает фосфорилированную форму AKT1, оно может также обнаруживать другие изоформы AKT (AKT2, AKT3), если эпитоп консервативен; при необходимости подтвердите специфичность с помощью моделей с изоформ-специфичным нокдауном или нокаутом.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio — ваш интегрированный партнер для закупки сырья для IVD, предлагающий обширный портфель, включающий валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реактивы оптом и специализированный поиск по редким мишеням. Это антитело к Phospho-AKT1 (Ser473) поддерживает исследования сигнальных путей AKT, особенно в области онкологии, метаболических нарушений и изучения выживаемости клеток. От концепции до клиники CamelBio упрощает доступ к критически важным компонентам, техническим знаниям и консультациям по нормативным требованиям для ускорения разработки диагностических средств.