Кроличье моноклональное антитело против фосфо-Akt-T308 для ВБ, ИФА – P31749 / P31751 / Q9Y243

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация AKT (AKT1/AKT2/AKT3)

• AKT1 является одной из трех тесно связанных серин/треонин-протеинкиназ (AKT1, AKT2, AKT3), которые регулируют важнейшие процессы, такие как метаболизм, пролиферация, выживание клеток, рост и ангиогенез. Связанные источники: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136

• Будучи центральным узлом сигналинга PI3K, AKT фосфорилирует более 100 нижележащих субстратов по остаткам серина/треонина, опосредуя эффекты инсулина, факторов роста и других стимулов. Связанные источники: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:21432781

• При гомеостазе глюкозы AKT стимулирует стимулируемое инсулином поглощение глюкозы путем транслокации SLC2A4/GLUT4 и синтез гликогена за счет ингибирования GSK3A/B; также он фосфорилирует TBC1D4, что запускает связывание 14-3-3, необходимое для транспорта глюкозы. Связанные источники: PMID:11994271

• AKT обеспечивает выживание клеток путем фосфорилирования и ингибирования проапоптотических субстратов, таких как MAP3K5, BAD и факторы транскрипции FOXO, что приводит к секвестрации FOXO-белков в цитоплазме и повышению экспрессии антиапоптотических генов, таких как BCL2 и MCL1, через CREB1. Связанные источники: PMID:11154276, PMID:10358075, PMID:9829964, PMID:10926925

• AKT активирует сигналинг mTORC1 путем фосфорилирования TSC2 и других регуляторов (CASTOR1, DEPDC5), тем самым контролируя синтез белка и рост клеток. Связанные источники: PMID:12150915, PMID:12172553, PMID:31548394, PMID:33594058

• Субклеточная локализация AKT охватывает цитоплазму, ядро, клеточную мембрану и межмембранное пространство митохондрий, что отражает многообразие его функций.

• У человека AKT1 экспрессируется универсально, а повышенные уровни его фосфорилированной формы наблюдаются при раке предстательной железы и молочной железы, что указывает на его роль в прогрессии опухолей.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический фосфопептид, соответствующий области Thr308 человеческого Akt; фосфорилирование по этому остатку критично для активации Akt. Поэтому антитело специфично к фосфорилированной форме и не распознает нефосфорилированный Akt.
• Поскольку остаток Thr308 консервативен у изоформ AKT1, AKT2 и AKT3, ожидается перекрестная реакция антитела с соответствующими фосфорилированными формами у мыши и крысы, что подтверждается данными о перекрестной реактивности.
• При проведении вестерн-блоттинга при подготовке образцов используйте подходящие ингибиторы фосфатаз для сохранения фосфорилирования. Предсказанные молекулярные массы изоформ составляют ~48–55 кДа; подтверждайте специфичность полос с помощью положительных и отрицательных контролей (например, клеток, стимулированных инсулином, по сравнению с необработанными).
• Антитело можно использовать в ИФА для захвата или детекции фосфо-Akt в лизатах клеток; оптимизируйте условия покрытия и детекции под ваш конкретный тип образца.
• Поскольку фосфорилирование T308 является динамическим процессом, включайте в эксперимент подходящие контроли для оценки активации сигнального пути (например, обработку ингибитором PI3K).

CamelBio: ваш единый центр закупок

CamelBio является надежным партнером для производителей диагностических тестов и исследовательских лабораторий, предлагая широкий ассортимент сырья для ИВД, включая фосфоспецифичные антитела, такие как этот антитело против фосфо-Akt-T308. Наш портфель включает редкие мишени, вспомогательные реагенты крупными партиями и валидированные пары антител для поддержки вашего процесса разработки тестов. От отдельных реагентов до полных решений по снабжению мы помогаем оптимизировать ваш путь от идеи до клинических исследований.