Кроличья поликлональная антитело против PHD3 для Вестерн-блоттинга (WB), ИГХ (IHC-P), ИФ (IF/ICC), ИФА (ELISA) - Q9H6Z9

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация PHD3

• PHD3, также известный как гомолог Egl nine 3, HIF-пролилгидроксилаза 3 (HIF-PH3) и белок, содержащий домен пролилгидроксилазы 3 (PHD3), кодируется геном EGLN3 и является пролилгидроксилазой, которая опосредует гидроксилирование остатков пролина в белках-мишенях, таких как PKM, TELO2, ATF4, GPX4 и HIF1A (PubMed:19584355, PubMed:20978507, PubMed:21483450). Связанные ссылки: PMID:19584355, PMID:20978507, PMID:21483450
• Являясь клеточным датчиком кислорода, в условиях нормоксии PHD3 катализирует гидроксилирование специфических остатков пролина в альфа-субъединицах индуктируемого гипоксией фактора (HIF1A и HIF2A), направляя их на протеасомную деградацию через комплекс фон Гиппеля-Линдау, тем самым ослабляя гипоксический ответ (PubMed:11595184, PubMed:12181324). Связанные ссылки: PMID:11595184, PMID:12181324
• PHD3 действует как ингибитор ферроптоза, гидроксилируя GPX4 и предотвращая его деградацию посредством шаперон-опосредованного аутофагии; этот процесс стимулируется PSAT1, обеспечивающим субстрат 2-оксоглутарат (PubMed:40281343). Связанные ссылки: PMID:40281343
• Также гидроксилирует PKM при гипоксии, ограничивая гликолиз (PubMed:21483450, PubMed:21620138). Связанные ссылки: PMID:21483450, PMID:21620138
• PHD3 является регулятором апоптоза: в кардиомиоцитах он подавляет антиапоптотический эффект BCL2, нарушая комплекс BAX-BCL2 (PubMed:20849813); в нейронах он оказывает проапоптотический эффект, индуцированный NGF, регулируя активность CASP3 (PubMed:16098468). Связанные ссылки: PMID:20849813, PMID:16098468
• Белок необходим для гипоксической регуляции нейтрофильного воспаления (PubMed:21317538) и играет решающую роль в реакции на повреждение ДНК, гидроксилируя TELO2 и способствуя его взаимодействию с ATR для активации пути ATR/CHK1/p53 (PubMed:22797300). Связанные ссылки: PMID:21317538, PMID:22797300
• PHD3 локализуется как в ядре, так и в цитоплазме и широко экспрессируется на низком уровне, с более высокой экспрессией в сердце, легких, плаценте и поджелудочной железе (ацинарные клетки и клетки островков) взрослого организма, а также в селезенке, сердце и скелетных мышцах плода.
• Ключевые слова, связанные с PHD3, включают апоптоз, цитоплазма, диоксигеназа, повреждение ДНК, железо, связывание металла, ядро, оксидоредуктаза, идентификация протеомики, референсный протеом, конъюгация Ubl и витамин C.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический пептид, соответствующий N-концевой области (а.к. 1-100) человеческого PHD3, который консервативен у человека, мыши и крысы (UniProt Q9H6Z9). Полученное поликлональное антитело, как ожидается, будет распознавать как нативный, так и денатурированный PHD3, что подходит для различных применений.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) ожидается полоса около 27 кДа. Оптимальное разведение антитела следует определять экспериментально, так как вариативность между партиями свойственна поликлональным антителам.
• При иммуногистохимии (IHC-P) и иммунофлуоресценции (IF/ICC) рассмотрите методы демаскировки антигенов, соответствующие парафиновым срезам, фиксированным в формалине. Проверьте специфичность окрашивания в тканях с известной экспрессией (например, сердце, легкие, плацента взрослого организма).
• Для ИФА (ELISA) антитело можно использовать как для захвата, так и для обнаружения в зависимости от формата анализа. Протестируйте различные концентрации покрытия и условия блокировки для достижения наилучшего соотношения сигнал/шум.
• Перекрестная реактивность с мышью и крысой подтверждена выравниванием последовательностей; тем не менее, перед масштабным использованием рекомендуется валидация в соответствующей системе образцов.
• В силу поликлональной природы характеристики, зависящие от серии, могут варьироваться. Включите соответствующие положительные и отрицательные контроли (например, лизаты клеток с нокаутом PHD3) для подтверждения специфичности.

CamelBio: Ваш мост для закупок полного цикла

CamelBio оптимизирует закупки сырья для IVD, предоставляя валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела и вспомогательные реактивы оптом для производителей диагностических средств и исследовательских лабораторий. Это поликлональное антитело против PHD3 поддерживает исследования гипоксии, апоптоза, ферроптоза и повреждения ДНК, дополняя экспертность CamelBio в поиске материалов для редких мишеней. От концепции до клиники наши комплексные технические и логистические решения помогают ускорить разработку ваших анализов.