Поликлональное антитело против PENK для ВБ, ИФ, ИГХ, ИФА — P01210

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация проэнкефалина А

• Проэнкефалин А (PENK) представляет собой предшественниковый белок, который после протеолитической обработки генерирует несколько активных опиоидных пептидов, включая Мет-энкефалин и Лей-энкефалин, которые критически важны для модуляции восприятия боли и стрессовых реакций.
• Кодируемые им энкефалины действуют как эндогенные лиганды опиоидных рецепторов, имитируя эффект опиоидных препаратов и играя ключевую роль в анальгезии, регуляции вознаграждения и стресса.
• Один из продуктов его расщепления, Мет-энкефалин-Арг-Фен, является сильным агонистом мю-опиоидного рецептора (OPRM1) в прилежащем ядре, что приводит к долговременной синаптической депрессии высвобождения глутамата.
• Пептиды, производные PENK, также проявляют неопиоидные эффекты за счет связывания с рецептором MRGPRX1, индуцируя зуд, не зависящий от гистамина, и ноцицептивные ощущения в сенсорных нейронах. Связанные источники: PMID:11850634 PMID:28223516 PMID:21593341
• Субклеточно проэнкефалин А локализован в люмене секреторных везикул, например, хромаффинных гранул, и секретируется при стимуляции, что соответствует его роли нейропептида.
• Белок содержит структурные элементы, включая сигнальный пептид, множество сайтов расщепления в спаренных основных остатках и дисульфидную связь, которые необходимы для его обработки и секреции.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген покрывает аминокислоты 25–267 человеческого проэнкефалина А, охватывая большую часть предшественникового белка. Это поликлональное антитело может распознавать как полноразмерный предшественник, так и его обработанные фрагменты.
• Для Вестерн-бллоттинга (ВБ) прогнозируемая молекулярная масса полноразмерного предшественника составляет 31 кДа; однако из-за посттрансляционной обработки можно наблюдать несколько полос, соответствующих пептидам, содержащим энкефалин. Рекомендуется оптимизация процента геля и контрольных загрузок.
• При иммуногистохимии (ИГХ-П) и иммунофлуоресценции (ИФ-П) следует валидировать подходящую фиксацию (например, 4% ПФА) и методы антигенного восстановления для целевой ткани, так как антигены нейропептидов могут быть чувствительны к чрезмерной фиксации.
• Перекрестная реактивность с мышью и крысой позволяет проводить трансляционные исследования на этих видах, но рекомендуется видовая валидация специфичности антитела с помощью контрольных нокаутов или блокирующих пептидов.
• Для иммуноферментного анализа (ИФА) может потребоваться сопряжение с подходящим детектирующим антителом. В ходе титровальных экспериментов следует определить оптимальные концентрации антител для покрытия и детекции.

CamelBio: ваш универсальный мост для закупок

CamelBio сотрудничает с производителями диагностических препаратов и исследовательскими институтами для предоставления широкого ассортимента сырья для производств IVD, включая валидированные поликлональные и моноклональные антитела, такие как это антитело против PENK. Независимо от того, нужны ли вам массовые вспомогательные реактивы, индивидуально подобранные пары антител или помощь в поиске редких мишеней для нейробиологических исследований и изучения боли, наша универсальная закупочная платформа поддерживает вашу работу от концепции до клинических испытаний.