Моноклональное антитело против PCK1 (PEPCK-C) для вестерн-блоттинга и ИФА — P35558

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация PCK1

• PCK1 (фосфоенолпируваткарбоксикиназа 1) представляет собой цитозольную изоформу PEPCK и является лимитирующей скорость ферментом глюконеогенеза. Он катализирует обратимую декарбоксилирование и фосфорилирование оксалоацетата до фосфоенолпирувата, регулируя баланс катаплеротического и анаплеротического потоков в цикле лимонной кислоты. Связанные источники: PMID:24863970, PMID:26971250, PMID:28216384

• При низкой концентрации глюкозы PCK1 запускает катаплеротическое превращение оксалоацетата в фосфоенолпируват для глюконеогенеза; при высоком уровне глюкозы он способствует анаплеротическому превращению фосфоенолпирувата в оксалоацетат. Связанные источники: PMID:30193097

• Помимо метаболической функции, фосфорилирование серина-90 белком AKT1 превращает PCK1 в серин-протеинкиназу. Эта дополнительная киназная активность запускает транслокацию белка в эндоплазматическую сеть, где он фосфорилирует INSIG1/2, что приводит к высвобождению транскрипционных факторов SREBP и активации экспрессии липогенных генов. Связанные источники: PMID:32322062

• PCK1 поддерживает гомеостаз памяти клеток CD8+ Т-лимфоцитов, поставляя фосфоенолпируват для путей синтеза гликогена и пентозофосфатного пути (по аналогии).

• В субклеточном масштабе PCK1 преимущественно локализован в цитозоле, но после фосфорилирования опосредованного AKT он транслоцируется в эндоплазматическую сеть.

• Основные сайты экспрессии в тканях — печень, почки и адипоциты, что отражает его центральную роль в метаболизме глюкозы и липидов.

• Посттрансляционные модификации PCK1 включают ацетилирование, убиквитинирование и фосфорилирование; по структурной классификации PCK1 относится к ГТФ-связывающим киназам, лиазам и декарбоксилазам.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген получен против синтетического пептида, включающего аминокислоты 523–622 вблизи С-конца, дистально от сайта фосфорилирования Ser-90; учитывайте это при планировании экспериментов по фосфо-специфическому или изоформо-специфическому детектированию.
• Для вестерн-блоттинга рекомендуется проводить валидацию детектирования в лизатах печени/почек человека, мыши или крысы, так как эти ткани экспрессируют PCK1 на высоком уровне. Индукция глюконеогенеза (например, голодание/обработка цАМФ) может усилить сигнал.
• В ИФА рекомендуется предварительно проверить сочетаемость антитела и совместимость с сэндвич-форматом; моноклональная природа антитела гарантирует стабильную специфичность во всех партиях.
• Учитывая прогнозируемую молекулярную массу 69 кДа, убедитесь в достаточном разрешении геля и корректных условиях переноса; посттрансляционные модификации могут сдвинуть наблюдаемую полосу.

CamelBio: ваш единый центр поставок реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов и лабораториям, занимающимся исследованиями метаболизма, единый доступ к валидированным сырьевым материалам для ИВД, включая моноклональные и поликлональные антитела, такие как этот клон против PCK1. От поставки больших парений вспомогательных реагентов до поиска редких сырьевых материалов для целевых таргетов — мы поддерживаем весь ваш рабочий процесс разработки тест-систем, помогая плавно пройти путь от идеи до клинических испытаний. Для исследований глюконеогенеза, диабета или липидного обмена наш антитело к PCK1 можно скомбинировать с оптимизированными парами антител и получить техническую консультацию от наших специалистов.