Кроличье моноклональное антитело к PARP1 для WB, IF, IHC, ELISA — P09874

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функции и локализация PARP1

• PARP1 функционирует как поли-АДФ-рибозилтрансфераза, катализируя перенос фрагментов АДФ-рибозы с NAD+ на белки-мишени. Эта активность имеет ключевое значение для репарации повреждений ДНК и поддержания геномной целостности. Связанные публикации: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500

• После распознавания разрыва цепи ДНК PARP1 рекрутирует HPF1 для инициирования серинового АДФ-рибозилирования гистонов (например, H2B в положении Ser6 и H3 в положении Ser10), что приводит к декомпактизации хроматина и сборке репарационных комплексов. Связанные публикации: PMID:18172500, PMID:19344625, PMID:17177976

• PARP1 участвует как в путях репарации оснований (BER), так и в путях репарации двуцепочечных разрывов (DSBR). Он взаимодействует с TIMELESS, способствуя гомологичной рекомбинации посредством поли-АДФ-рибозилирования факторов репарации. Связанные публикации: PMID:26344098, PMID:30356214

• Помимо репарации ДНК, PARP1 регулирует транскрипцию, связываясь с нуклеосомами и изменяя архитектуру хроматина подобно гистону H1, тем самым подавляя активность РНК-полимеразы II. Связанные публикации: PMID:15607977, PMID:22464733

• PARP1 является важным медиатором программируемой гибели клеток. Его продукт расщепления каспазами-3/7 перемещается в цитоплазму, перенося цепи поли-АДФ-рибозы, которые запускают апоптоз, зависимый от AIFM1. Связанная публикация: PMID:33168626

• Внутри клетки PARP1 преимущественно локализуется в ядре, ядрышке и на хромосомах. После фосфорилирования PRKDC он может перемещаться в цитоплазму, где регулирует пути врождённого иммунитета, такие как путь cGAS-STING. Связанная публикация: PMID:35460603

• PARP1 катализирует собственное авто-поли-АДФ-рибозилирование — важную регуляторную модификацию, контролирующую его активность, взаимодействия с белками и рекрутирование к участкам повреждения ДНК. Связанные публикации: PMID:17396150, PMID:19764761, PMID:24906880

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген расположен в пределах аминокислот 200–300 человеческого PARP1 — в области, содержащей второй цинковый палец и часть домена BRCT. Ожидается, что полученное кроличье моноклональное антитело будет распознавать эпитоп, консервативный среди указанных реактивных видов (человек, мышь, крыса).
• При проведении вестерн-блоттинга (WB) должна обнаруживаться преобладающая полоса приблизительно на уровне 113 кДа. В качестве источника образца рекомендуется использовать ядерные экстракты, а специфичность подтверждать с помощью нокдауна PARP1, опосредованного siRNA.
• В иммунофлуоресценции (IF/ICC) и иммуногистохимии (IHC-P) ожидаются ядерные или хромосомные паттерны окрашивания. Поскольку для парафиновых срезов может потребоваться демаскировка антигенов, оптимизируйте протоколы тепловой демаскировки эпитопов на основе цитрата или EDTA для используемой ткани.
• Сообщается о применении антитела в ELISA. Для сэндвич-ELISA рекомендуется использовать вторичный клон, нацеленный на отдельный эпитоп; попарный скрининг в лаборатории поможет определить оптимальные комбинации для захвата и детекции.
• Поскольку PARP1 подвергается обширным посттрансляционным модификациям и расщеплению, при интерпретации результатов учитывайте биологический контекст (например, индукцию повреждения ДНК или апоптоза). В зависимости от условий обработки полноразмерная и расщеплённая формы могут присутствовать одновременно.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по снабжению

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и научно-исследовательским институтам оптимизированную универсальную платформу для закупки сырья для IVD. Это моноклональное антитело к PARP1, ориентированное на исследования повреждения ДНК, онкологии и нейродегенеративных заболеваний, входит в наш обширный каталог, созданный для ускорения разработки анализов с помощью готовых к использованию высококачественных реагентов. Помимо отдельных антител, мы предлагаем валидированные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный поиск редких мишеней, обеспечивая надёжные поставки на всех этапах — от разработки до клинического применения.